“蓝香水”月季组织培养技术的研究(2)
本实验以“蓝香水”月季为实验材料，从月季的增殖培养、防褐变剂的选择、外植体的选择、愈伤组织的诱导、增殖、再生和诱导生根等方面，研究月季组织培养技术，为月季快繁提供理论依据。
1．材料与方法
1.1实验材料
在周口市川汇区花卉市场购买月季品种“蓝香水”，从月季上选取当年生带侧芽的幼嫩茎段为实验材料。
1.2实验方法
1.2.1月季增殖培养的实验方法
在超净工作台上，将切成1.0～2.0cm长的茎段（带腋芽）用75%酒精浸泡30s，水冲洗2～3次；再用0.1%升汞消毒10min，然后无菌水冲洗5～6次，用灭菌的滤纸把茎段表面水吸干，放入无菌的培养皿中备用。
以MS为基本培养基，添加不同浓度的6-BA（0.5、1.0、1.5mg/L）、NAA（0.05、0.10、0.15mg/L），蔗糖浓度为30g/L，琼脂7g/L，pH5.8。材料在光照强度800～1300lx，温度25℃，光照时间15h/d条件下培养。每个处理30个茎段，重复3次，培养30d，统计增殖倍数、成活率并观察生长状况。
1.2.2防褐变剂选择的实验方法
将月季切成1.0～1.5cm长的茎段（带腋芽），用75%酒精浸泡30s，水冲洗2～3次；再用0.1%升汞消毒10min，无菌水冲洗5～6次，用无菌滤纸把茎段表面水分吸干，放入无菌的培养皿中备用。
在培养基MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.05mg/L培养基上，添加不同用量的活性炭（1.5、2.5、3.5g/L）和抗坏血酸（0.5、1.0、1.5g/L），蔗糖浓度为30g/L，琼脂7g/L，pH5.8。并设置对照。在光照时间15h/d、温度23℃、光照强度800～1200lx条件下培养30d，统计并计算根条数、平均根长、发芽率、成活率。
1.2.3外植体选择的实验方法
在超净工作台中对试验材料做如下处理：先用75%酒精表面消毒20s再用7%～8%的次氯酸钠溶液消毒6min，无菌水漂洗3～5次。培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 2.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L，蔗糖30g/L，pH5.8，琼脂7g/L。在光照时间15h/d、光照强度1200～1500lx条件下培养。重复3次，培养4周后统计各外植体的诱导数，计算诱导率。
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