上个世纪初,果蝇就已进入生物学家的视野。在探索和研究果蝇的过程中,生物学家们获得了大量的科研成果,从而推动了生命科学中各各不同领域的迅速发展。美国哥伦比亚大学的摩尔根教授及其同事通过对果蝇的多年研究,在1926年共同发表著名的《基因论》[4]。他们论证了染色体上具有控制生物性状的基因,并且呈线性排列。位于非同源染色体上的基因则在配子的形成与结合过程中彼此分离并且重新自由组合。位于同源染色体上的基因则在减数分裂的四分体时期发生交叉互换,改变原来连锁群内的基因。摩尔根以遗传的染色体学说为核心的基因论,使孟德尔遗传规律的物质特性得到了基本的落实,奠定了现代遗传学的基础[5]。
果蝇是一种真核多细胞生物,因其代谢系统、生理功能、生长发育等与哺乳动物基本相似,常用于有关实验研究。本实验以果蝇作为实验对象,研究甲硫氨酸对果蝇的生殖能力及寿命的影响,为评价甲硫氨酸的安全性以及用量的不同对人体的影响提供依据。
1.实验材料和仪器
1.1主要实验试剂
甲硫氨酸,蔗糖(分析纯),玉米粉(食品级),活性酵母(食品级),酵母浸粉为国产生物试剂由北京奥博星生物技术有限责任公司提供,琼脂粉为国产生化试剂,丙酸为国产分析纯,均由天津市科密欧化学试剂有限公司提供,乙醚由开封市方晶化学试剂有限公司提供。
1.2主要实验器材
电子显微镜型号为:CX21FS1.由菲律宾制造,智能型光照培养箱型号为MGC-350.由郑州生元仪器有限公司制造,电热鼓风干燥箱型号为:DHG-2150B.由郑州生元仪器有限公司制造,电子天平是由奥豪斯仪器(上海)有限公司制造,电子万用炉由北京市永光明医疗仪器厂制造,10ml量筒,烧杯(1000ml,500ml,50ml若干),锥形瓶(100ml,150ml)若干,不锈钢锅,玻璃棒。
1.3果蝇品系
黑腹果蝇(drosophila melanogaster)野生型,由周口师范学院生命科学与农学学院提供。前后总共收集的果蝇有1500只,最后选取360只体型大小相似且行为外观正常的果蝇,进行果蝇的寿命试验。同时,选择72只同步化的果蝇(8小时内羽化的果蝇),雌雄各半,进行果蝇的发育和繁殖观察实验。
1.4果蝇培养基的配方
表1基础培养基的配置
药品    水    蔗糖    玉米粉    琼脂粉    酵母浸粉    丙酸
剂量    200ml    13g    17g    1.5g    3g    1ml
甲硫氨酸培养基:用电子天平分别称取不同量的甲硫氨酸,在未凝固的培养基中迅速搅拌,使其完全溶解即可。
2.实验方法
2.1果蝇培养基的制备
果蝇是以酵母菌为主要食料的,首先用量筒量取200ml蒸馏水,放入不锈钢锅中,在电炉上加热直至沸腾,然后称取:蔗糖13g,琼脂1.5g,玉米粉17g,依次加入沸水中,在加入的过程中不停的搅拌使加入的实验材料能够充分混匀。同时也能防止培养基在锅底凝结甚至焦糊,以免影响培养基的成分,造成实验误差。待培养基稍凉后加入酵母粉3g及1ml丙酸并充分混匀,按甲硫氨酸体积与培养基体积比0.001%、0.01%和0.1%分别将对应体积的甲硫氨酸加入三个试验组培养基,空白对照组为普通培养基。
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