1.2  蚕丝组成及结构 蚕丝由蚕体内的丝腺分泌,主要由约 70%丝素和 25%丝胶两部分组成,其他的杂质含量约为 5%,其主要成分丝素和丝胶都是蛋白质,丝素蛋白被丝胶蛋白包裹在里面。蚕丝中含有碳、氢、氧、氮、硫等元素,不同的蚕及不同的饲养环境都会影响蚕丝中各组分的含量[3]。 丝胶蛋白等电点pH为 3.9,丝胶含量多少是影响蚕丝质量好坏的重要因素,因此天然蚕丝要织成高质量的丝绸要经过“脱胶”这一工序来除掉杂质和大部分的丝胶。 丝素分子由排列整齐紧密的整列部分和排列松散的无定形部分,整列部分结构紧密,阻止了水分子的进入,不易与化学要紧进行反应;无定形部分含有大量的反应基团,且结构松散,与化学药剂易发生反应[4]。柞蚕丝的截面性状为呈扁平的椭圆,表面呈现纵向的线形条纹并且纤文表面不规则 。其蚕丝含有丝胶含量较多,颜色灰黑,韧性较差。
1.3  酶 1.3.1  酶的分类 早在游牧时代,人类虽然还不知道什么是凝乳酶,但是已经懂得使用小牛的胃液来制作奶酪,这就是原始的酶工程。 酶工程发展到现在,已经被人类发现了四千多种酶,但是生物体内的酶的种类远远大于这些。酶的分类也多种多样,国际生物化学协会按照酶的催化反应类型将酶分为氧化还原酶、水解酶、转移酶、裂解酶、合成酶、异构酶优尔大类[6],每大类下面还根据底物或者作用基团分为若干个亚类。
1.3.2  酶的特性 酶由细胞分泌,本质大多数为蛋白质,小部分为 RNA,。酶能够改变原本反应的活化能,从而加快反应速度或者减缓反应速度,而对最终产物没有任何影响,自身也不会发生改变,并且能够脱离生物体而独立完成催化,与非生物催化剂催化方式类似。酶在催化过程中具有高度专一性,酶的活性中心与底物特异性结合,才能够进行催化。酶和底物结合后形成络合物,络合物也具有专一性,并改变了酶的溶解性、稳定性等理学性质[7]。
1.3.3  酶的分离纯化 分离纯化酶之前,要将酶进行预提取。将发酵后的菌液离心或者过滤。若所需酶为胞外酶,则取上清进行超滤、盐析、有机溶剂抽提等方法提取粗酶;若目的酶为胞内酶,则需要保留沉淀,进行细胞破碎后进行离心,保留上清进行预提取。 本实验采取硫酸铵盐析法,将蛋白酶提取出来。蛋白质在等电点时,由于各分子所带电荷相同相互排斥,并且蛋白质在水溶液中周围会产生水化膜,隔绝蛋白质分子之间聚集,故不能形成大分子而沉淀,加入强电解质后,产生的离子具有强烈的水化作用,使蛋白质表面的水化膜遭到破坏,并且蛋白质带有的电荷也会被中和,使蛋白质聚集而析出沉淀。硫酸铵具有较大的溶解度,而且水溶液中存在较高的离子浓度和较大的离子电荷,故常被用作蛋白质盐析[8]。      酶的分离纯化方法有很多种,常规的分离纯化方法有以下几种:凝胶过滤、疏水层析、离子交换层析、亲和层析等[9],按照不同的酶可以适当的选择一种或者多种进行分离纯化,一种酶的提纯过程中常常用到多种方法共同作用。常规的分离方法费时费力,而且回收效率比较低,针对这些缺点开发出了一些新型的纯化分离方法,例如:膜处理方法、免疫纯化技术、双水相体系、界面亲和层析等[10]。 在提纯时,酶提纯后的用途也要作为影响因素,一般的工业用酶对纯度的要求不是很严格,过分提高酶纯度反而会影响成本。
1.3.4 酶的保存      大多数的蛋白质对温度敏感,在 35℃~40℃条件下,大多数酶就会逐渐失活,即使保存在 0℃~4℃中一周左右也会失活,并且酶制剂纯度越高,失活的速度越快,所以通常都保存在-5℃~-20℃中。但是有一些酶对低温毫无抵抗力,例如过氧化氢酶只能保存在 0℃~4℃中,处于冰冻状态后则会永久失活。 将酶浓缩至结晶或制成干粉则会保存更长时间,某些酶在干粉状态冷冻在-15℃下甚至能保存八年。一般含水量小于 3%即可抑制其化学活性,即能相对长期的保存。 将酶至于保护剂中保存时间也会相应延长很多,例如惰性化学试剂(氨基酸、多元醇等)、中性盐(硫酸镁、氯化钠等溶剂)、巯基试剂等,将酶保存在这些保护试剂中再放入低温下保存,将会几十年保留酶活性。
上一篇:缺钙培养对花生幼苗生理影响
下一篇:原位电化学合成铜-铁普鲁士蓝纳米材料及其卡托普利检测应用

小鼠皮层PV+神经元fgfr2敲除对突触蛋白的影响

重金属铬对白尾灰蜻稚虫...

绿色丝状细菌绿小体被膜蛋白基因的克隆

无机物-蛋白酶晶体催化...

对二甲苯对视顶盖HDAC1蛋白表达的影响

大麦醇溶蛋白的提取及TGase催化糖基化改性

双生病毒Rep复制蛋白酵母表达系统的建立

神经外科重症监护病房患...

中国学术生态细节考察《...

公寓空调设计任务书

AT89C52单片机的超声波测距...

国内外图像分割技术研究现状

C#学校科研管理系统的设计

医院财务风险因素分析及管理措施【2367字】

承德市事业单位档案管理...

志愿者活动的调查问卷表

10万元能开儿童乐园吗,我...