摘要：目的 通过遗传标记分析金线莲种质资源的遗传多样性，鉴别金线莲的品种。方法 ISSR分子标记对9份供试材料进行PCR扩增，并对扩增结果进行电泳检测。结果 用遗传标记可区分不同地源的广西金线莲和福建金线莲，及同地源的福建金线莲公与福建金线莲母。 结论 金线莲的种质资源存在丰富的遗传多样性，为金线莲的品种鉴别和选育提供了基础。47485

Abstract: Objective To analyze the genetic persity of germplasm resources and the species identification of Anoectochilus roxburghii. by genetic markers. Methods  By ISSR- PCR amplification, nine samples amplified and electrophoresis detected. Results Anoectochilus roxburghii from different geographical provenances and from same habitats with different morphology can be differentiated by genetic marks. Conclusion The genetic persity of Anoectochilus roxburghii. provide the basis for species identification and breeding.

毕业论文关键词：金线莲；ISSR；PCR

    Key words：Anoectochilus roxburghii(Wall.) Ldl.；inter simple sequence repeats；polymerase chain reaction

目    录

1前言 4

1.1概述 4

1.2研究现状 4

1.2.1生物学特性 4

1.2.2药用价值 4

1.2.3主要成分 4

1.2.4临床应用 5

1.2.5组织培养 5

1.3分子标记 5

1.3.1 AFLP（Amplified fragment length poly morphism）扩增片段长度多态性 6

1.3.2 RAPD（Random amplified polymorphicDNA）随机引物扩增DNA多态性 6

1.3.3 ISSR（Inter-simple sequence repeats）简单重复序列间扩增 6

1.4研究意义 6

2材料与方法 7

2.1植物材料 7

2.2引物（上海生工合成） 7

2.3 基因组总DNA提取 7

2.3.1 CTAB法制备基因组DNA粗制品 7

2.3.2 UNIQ-10 柱式植物基因提取试剂盒（上海生工）纯化DNA 7

2.4 ISSR-PCR反应 8

2.4.1 反应体系 8

2.4.2 扩增程序 8

2.5琼脂糖凝胶电泳 8

3结果与分析 8

3.1 形态特征 8

3.1.1 福建金线莲 9

3.1.2广西金线莲 10

3.2 分子标记 10

3.2.1 ISSR-PCR 10

3.2.2 DNA多态性分析 11

4讨论 12

1前言

1.1概述

金线莲是兰科Orchidaceae开唇兰属Anoectochilus的全草。金线莲是珍稀中草药，具有清热凉血，除湿解毒，固肾平肝，降血脂、血糖等功效[1,2]，在民间有“金草”、“药王”的美誉。自然环境下，金线莲发芽率低，同时人为采摘和生境破坏的加剧，野生金线莲日益减少。在民间金线莲种源目前比较混乱，药农将花叶开唇兰属中具白色或黄色叶脉的品种和斑叶兰属（Good yera）中性状相近的种类作为金线莲进行采购。同时，在人工培养的过程中将花叶开唇兰属和班叶兰属的许多种作为金线莲，血叶兰也被称为金线莲，使金线莲种源杂乱，严重限制了金线莲的规模化生产。