乌龟（Chinemys reevesii）隶属爬行纲龟鳖目龟科，中国许多地方都有分布。其繁殖率低且生长较慢，耐饥能力较强，是较易人工饲养的爬行动物，其作为研究对象可减少其快速生长所带来的影响误差，同时也避免高死亡率增加研究难度系数。作为一种典型的外温动物，其生长、发育、繁殖、行为、分布等生命活动都易受到外界环境温度的影响。本文通过对不同驯化恒温下乌龟热适应性的研究，探讨恒温驯化对乌龟的喜好体温、热耐受临界温度及运动行为的影响，探讨恒温驯化对乌龟热适应能力的影响，并验证热驯化有益假说在龟鳖类动物中是否适用。

正文

1. 材料与方法

1.1实验动物的饲养

本实验中使用的所有乌龟都是由实验室受精卵孵化而来。这些受精卵是在2014年6月从海宁的一家私人孵化场采集而来，共120枚受精卵。将这些受精卵转移到实验室。准备好塑料盒（25×20×10 cm3），并将潮湿的蛭石填入其中，再将受精卵随机的分配到各个盒中。所有盒子都放入同一个人工气候培养箱中进行培养，温度设为29°C。2个月后，共有116枚受精卵孵化成功。孵化后，将乌龟们安置在六个60×45×30 cm3的水族箱里，水深约为15cm，每个水族箱放9-10只乌龟，并使温度维持在29℃，在水族箱中放置塑料板或瓷砖，这样就能为乌龟提供躲藏的地方，整个实验过程中都喂给乌龟足够的食物。 

2014年9月，从水族箱中随机挑选48只乌龟并将它们分为三组，每组16只。将这三组乌龟分别分配到17℃，25℃，33℃的控温室中，日光灯设置为07:00开启，18:00关闭，持续喂养4周使它们在特定的温度下驯化。 

1.2体温选择（Selected body temperature, Tsel） 

    设计一个1.5米长的水槽，在水槽的一端放入冰块，另一端下方放置电暖炉，用量温计测定水槽各段的温度，通过对两端的加热或降温进行调整，使整个水槽形成一个从0℃~40℃温度梯度的环境。当水槽中的温度梯度稳定后，把一组乌龟随机放入水槽的各个位置，约1小时后，测定各乌龟停留位置的温度，再将乌龟放回原来的水族箱饲养，用同养的方法测试其他组乌龟的选择体温并记录。在测试过程中应准备足够的冰块，随时测温调整温度，使水槽温度维持在梯度温度

1.3耐受低温（critical thermal minimum, CTMin）

    将乌龟放入孵化箱中，起始温度为乌龟的驯化温度，设定温度程序为每半小时下降3℃直至温度为0℃，期间持续观察乌龟的活力，当乌龟活力减弱并进入萎靡状态时，用测温记测量乌龟肛门温度，测得温度为耐受低温。耐受高温（critical thermal maximum, CTMax）：将乌龟放入孵化箱中，起始温度为乌龟的驯化温度，设定温度程序为每半小时上升3℃直至温度为40℃，期间持续观察乌龟的活力，当乌龟活力减弱并进入萎靡状态时，用测温记测量乌龟肛门温度，测得温度为耐受高温。

一般经过测量耐受高温的乌龟可能会受到高温影响而死亡，而经过耐受低温测定的乌龟经过一段时间的喂养后可逐渐恢复技能，故应先测定耐受低温再测定耐受高温。另外，将乌龟从孵化箱取出测量时，实验室温度会使乌龟体温快速恢复至最适体温，故在测量乌龟体温时，应快速准确，避免误差。