芸薹素内酯(BR)是第六类植物激素，而且是最新发现的。其特点为高效、快速、无毒，吸收后, 能调节植物的生理功能, 促进植物体内酶的活性, 促进植物的新陈代谢和 生长发育, 提高植物的产量, 增强植物抗性等[4]。在渗透胁迫下对植物施加外源BR，植物体内的各生理指标含量增加，如可溶性糖含量，脯氨酸含量等等。喷洒BR对渗透胁迫的草莓具有促进生长发育的作用,草莓幼苗中过氧化物酶的活性提高,丙二醛含量降低[5]。对玉米幼苗喷洒外源BR,各生理指标含量增加, 如脯氨酸和叶绿素含量增加，玉米幼苗的抗旱性增强[6]。在渗透胁迫条件下，在羊草不同发育期喷施不同浓度的BR溶液,在一定程度上起到了缓解作用，增加了羊草的质量[7]。喷洒一定浓度的BR溶液，木薯幼苗的Pro含量增加,SOD和POD活性均增强[8]。然而，关于BR对渗透胁迫下豌豆幼苗生长发育的影响还比较少。因此本研究以中豌2号为材料，外源BR处理，研究了不同浓度的BR溶液对豌豆幼苗生长及其生理生化反应的影响，为农业生产提供理论依据。

1. 材料与方法

1.1实验材料

豌豆（中豌2号），由周口市农科院提供。

1.2实验设计

    取优质豌豆种子，消毒12min在0.1%HgCl2溶液中,浸种一天一夜在自来水下。在20℃左右温度下催芽后，取发芽的种子腹沟朝下均匀分散的放在底部有孔、装有沙子的塑料培养盆中（每盆播30粒）。豌豆幼苗出两片叶片时，浇灌Hoagland营养液培养，培养5天后，进行如下处理。

    A、对照组（CK）：用Hoagland营养液浇灌，每天每个塑料培养盆根部浇灌20ml，同时用10mL清水喷洒豌豆幼苗叶片。

    B、渗透胁迫处理（PEG）：用含有20%聚乙二醇（PEG-6000)的Hoagland营养液浇灌根部，同时用10mL清水喷洒豌豆幼苗叶片。

    C、渗透胁迫+芸薹素内脂（0.05mg/L）处理：用含有芸薹素内脂（0.05mg/L）和20%聚乙二醇（PEG-6000)的Hoagland营养液浇灌根部，同时用10mL芸薹素内脂（0.05mg/L）喷洒豌豆幼苗叶片。

    D、渗透胁迫+芸薹素内脂（0.1mg/L）：用含有芸薹素内脂（0.1mg/L）和20%聚乙二醇（PEG-6000)的Hoagland营养液浇灌根部，同时用10mL芸薹素内脂（0.1mg/L）喷洒豌豆幼苗叶片。

    E、渗透胁迫+芸薹素内脂（0.2mg/L）：用含有芸薹素内脂（0.2mg/L）和20%聚乙二醇（PEG-6000)的Hoagland营养液浇灌根部，同时用10mL芸薹素内脂（0.2mg/L）喷洒豌豆幼苗叶片。

    F、渗透胁迫+芸薹素内脂（0.5mg/L）：用含有芸薹素内脂（0.5mg/L）和20%聚乙二醇（PEG-6000)的Hoagland营养液浇灌根部，同时用10mL芸薹素内脂（0.5mg/L）喷洒豌豆幼苗叶片。

    G、渗透胁迫+芸薹素内脂（1.0mg/L）：用含有芸薹素内脂（1.0mg/L）和20%聚乙二醇（PEG-6000)的Hoagland营养液浇灌根部，同时用10mL芸薹素内脂（1.0mg/L）喷洒豌豆幼苗叶片。

    处理6d后，取各处理样测定豌豆幼苗的株高、叶绿素含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、脯氨酸含量、过氧化氢酶活力等指标.实验重复3次，求平均值，用Excel制图。

1.3实验方法

1.3.1株高的测定

用卷尺测量幼苗高度

1.3.2游离脯氨酸（Pro）的测定

测定游离脯氨酸的含量参照刘萍等的方法[9]。剪取豌豆幼苗的叶片0.5g，剪碎，并放入试管中，加入5ml 3%的磺基水杨酸，沸水浴加热 10分钟，冷却、再用3000r/min的离心机离心10分钟。然后取上层液2mL放入试管中，加入2mL冰醋酸，2ml 3%的磺基水杨酸，再加入4mL酸性茚三酮，放入比色杯中，进行显色、萃取在520nm处进行比色，计算脯氨酸的含量。