本论文研究不同钡离子浓度对鲫鱼鳃一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,在实验中,将鲫鱼暴露于0 mmol/L、0.1 mmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L四种浓度的钡溶液曝气水中,创建鲫鱼的钡鳃损伤模型。观察四天内鲫鱼往返次数情况,

在不投掷食物96 h后,处死鲫鱼并剥离鳃组织,测定鳃一氧化氮合酶(NOS)活性。分析一氧化氮合酶(NOS)活性变化情况,揭露钡对鲫鱼鳃损伤机制。

观察鲫鱼的行为和鳃中一氧化氮合酶(NOS)活性的变化, 目的在于研究碱土金属钡离子对鲫鱼鳃损伤机制,对保证鱼类的健康养殖与防治环境污染具有至关重要的意义。

2 材料与处理

2.1 供试材料

2.1.1实验动物

人工养殖鲫鱼。从徐州文沃市场购买20条大小相近、健康活泼、表皮完好的鲫鱼,分别置于四个水箱中,放置氧气泵,饲养在实验室环境下3天。

2.1.2实验试剂

一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒(由南京建成生物工程研究所制备)、生理盐水(0.9%)、双蒸水。

     测定试剂盒的组成以及制备(100T/48样):

表2-1 一氧化氮合酶(NOS)测定测试盒的组成与配制

Table 2-1 The Composition and Preparation of Nitric oxide synthase (NOS) Text Kit

试剂编号 剂量 注意事项

一号试剂 缓冲液:6 ml (4瓶) 

在-20 ℃以下避光的环境下冷冻保存3个月。化冻摇匀才能使用。

二号试剂 促进剂:白色或淡黄色粉剂(6支)

稀释液:0.6 ml (6支) 冷冻保存在-20 ℃以下的温度下,保存6个月。使用后可将剩下的试剂放入-20 ℃以下温度下冷冻保存,但是时间不得超过一周。

三号试剂 显色剂:6 ml液体(2瓶) 在4 ℃避光环境下保存3个月。

四号试剂 透明剂:6 ml(2瓶) 室温下保存6个月。天气寒冷后会出现凝固现象,可进行37 ℃水浴使之变澄清时再使用。

五号试剂 终止剂:60 ml(2瓶) 4 ℃温度条件下保存6个月。实验室温度低时,会出现浑浊,可进行37 ℃水浴使之变透明时再使用。

六号试剂 液体10 ml(1瓶) 4 ℃温度条件下保存6个月。临用前如观察到在瓶壁或瓶底有结晶,应采取措施至其完全溶解后,才可使用。

2.1.3实验设备 

  手动组织匀浆器、一台TGL-16B高速枱式离心机、一台DK-SI4电热恒温水浴锅、赛多利斯电子天平、配1 cm光径比色杯的分光光度计、1个1000 ul的Eppendorf移液枪、1个100 ul的Eppendorf移液枪、1个10 ul的Eppendorf移液枪,并且若干对应3种型号对应的枪头、1.5 mlEP管22个。             

2.2 实验预处理

2.2.1样本要做的预处理

    投毒与观察:将所买鲫鱼称重并每组分5条,放于充足曝气2天的水箱中,分别投放不同浓度的氯化钡溶液中,将鲫鱼预饲养4天,并在实验室条件下观察4天。4个水箱投放氯化钡情况如下:

    第一组:为对照组,正常饲养;

    第二组:为实验组,在0.1  mmol/L Ba浓度环境下饲养;

    第三组:为实验组,在1.0  mmol/L Ba浓度环境下饲养;

    第四组:为实验组,在2.0  mmol/L Ba浓度环境下饲养。

上一篇:林地养鸡对昆虫和土壤动物多样性的影响
下一篇:利用转录组学研究甘薯响应黑斑病的分子机制

稻田锌含量对水稻害虫褐...

甲苯二甲苯对斑马鱼幼鱼神经的毒性影响

PEG6000模拟干旱胁迫对大麦...

教育实习前后生物专业师...

小鼠皮层PV+神经元fgfr2敲除对突触蛋白的影响

重金属铬对白尾灰蜻稚虫...

对二甲苯对视顶盖HDAC1蛋白表达的影响

AT89C52单片机的超声波测距...

国内外图像分割技术研究现状

神经外科重症监护病房患...

志愿者活动的调查问卷表

C#学校科研管理系统的设计

承德市事业单位档案管理...

医院财务风险因素分析及管理措施【2367字】

中国学术生态细节考察《...

公寓空调设计任务书

10万元能开儿童乐园吗,我...