在植物组织和器官的形成发育过程中,质体的发育出现了不同的类型:叶绿体存在于绿色组织中,淀粉体存在于贮藏组织和根中,有色体存在于花、果实和根等组织中(Egea et al., 2010; Marano et al., 1993)。质体分化大多发生于花组织中而非叶子中,这表明组织特异性表达是由转录或转录后水平调控的 (Egea et al., 2010)。同时,不同组织以及植物发育不同阶段,对叶绿素的需求有显著差异。我们通常认为叶子是高等植物光合产物的主要来源,但植物的一些生殖器官也具有光合活性,例如花瓣蕾、花、果实和种子 (Aschan and Pfanz, 2003; Vemmos and Goldwin, 1993)。在早期发育阶段,由于成熟的花瓣或萼片(或两者)中叶绿体向有色体过渡,大多数开花植物的叶绿素绿色消失,花瓣颜色改变。之后叶绿体叶绿素含量降低,同时积累了大量的类胡萝卜素,吸引鸟、蜜蜂和蝴蝶等,从而有利于授粉 (Aschan et al., 2005; Marano et al., 1993; Whatley and Whatley, 1987)。这一高度调节的过程包括了复杂的生理和超微结构的改变,受复杂遗传机制的调控 (Marano et al., 1993; Salopek-Sondi and Magnus, 2007)。
目前,人们已经积累了大量关于叶片叶绿体的相关信息,包括光合组分和光合基因表达调节机制等 (Eckhardt et al., 2004; Vainstein and Sharon, 1993)。并且在质体的形成和分化、结构、生化和分子方面的研究也获得了很大进展 (Egea et al., 2010; Marano et al., 1993)。但是,我们对绿色组织(例如叶子)和丰富多彩的有色组织(例如花和果实)中叶绿体生物合成差异的了解却稍逊色。
测定植物各组织叶绿素含量可以了解植物的光合作用能力,有利于我们提高辨别植物利害的能力。油菜是最易栽培的农作物之一,原产地在欧洲和中亚地区,在植物学上属于一年生的草本植物,是十字花科。在我国栽培比较广,以长江流域及以南各最多。自1995年以来,我国常年种植面积1亿亩,年产菜籽将近1000万吨,源`自·优尔.文/论:文'网,www.youerw.com占油料作物总量的40%~45%(不含大豆);同时还生产大约600万吨菜籽饼粕。饼粕蛋白质含量可达到40%,菜籽蛋白质氨基酸组成合理,赖氨酸含量和大豆相当,且赖氨酸、蛋氨酸等一些含硫氨基酸的含量高于大豆蛋白质,是我国有待开发利用的最大宗优质饲用蛋白源。
农民常在农田冬春休耕期间在田地里洒上油菜籽,播种后约两个月便可开出朵朵黄色的小花,待到第二年春天,农民再将油菜耕入土中来增加土壤的养分。油菜花由4枚花瓣、1枚雌蕊、4枚长雄蕊、两枚短雄蕊组成,富含花粉。种子含油量可达35~50%,可用于榨油或当作饲料。油菜花的嫩茎和叶也可以当作蔬菜食用。除此之外,在食品工业中还可以制作人造奶油、人造蛋白。在机械、冶金、造纸、橡胶、制皂、化工、油漆、纺织、皮革和医药等方面有广泛用途,具有重要经济价值。
在本实验中,我们对油菜 (Brassica napus L.)叶子和花两种组织中叶绿体生物合成的差异进行了比较,其中也包括了色素含量和叶绿素生物合成相关基因的表达。结果表明,花瓣中叶绿素含量较少且叶绿素a/b比值较低,但类胡萝卜素含量较高。相反,叶子中叶绿素含量较高且叶绿素a/b比值也较高。此外,我们的生理数据与相关基因的表达水平密切相关,定量PCR结果表明,叶子中几乎所有的叶绿素生物合成相关基因(尤其是下游结构基因)的表达都比花瓣中的高。以上结果加深了我们对特定组织中叶绿体发育调控机制的理解。
1材料与试剂
1.1 植物材料
本研究中我们用到材料为甘蓝型油菜。在2015年9月20日将油菜种子种入9厘米的陶盆中,并在当年10月25日有四片叶子的时候将其移植到试验区。植物所有生长阶段均长在试验田里。所有的植物样品都取自2016年3月20日处于开花期的油菜。收获的所有样品应立即浸入液态氮中,并保持在 -80 °C的温度。