复合菌剂对四溴双酚A胁迫下大豆幼苗生长及抗氧化酶的影响(2)
参考文献 18
致 谢 21
复合菌剂对四溴双酚A胁迫下大豆幼苗生长及抗氧化酶的影响引言
四溴双酚A 是一种难溶于水的有毒性阻燃性物质，是现在国内外应用最广泛的反应型阻燃剂之一[1]。然而，在其产品的使用、废弃和处理过程中可能释放到环境中造 成污 染[2-3]。据报道，四溴双酚A对水生生物具有较强的毒性作用[4-5]。有研究表明，四溴双酚A对陆生植物也具有一定的毒害效果。Sverdrup等研究表示四溴双酚A对红三叶草的毒害效果不明显，对三叶草的发芽和根长没有影响[6]。Li和Dogan报道了四溴双酚A对小麦幼苗和鹰嘴豆均具有毒害作用[7-8]。但是，目前国内外对于如何缓解四溴双酚A的毒害作用还鲜有报道。
复合菌剂是由单一或多种混合的对机体有益的微生物复合菌体，经过培养而形成的绿色生物肥料，复合菌剂含有活性酶，有益微生物，有机质和微量元素[9]。由于复合菌剂具有上述特点，在农业应用中复合菌剂能够提高产量、改善土壤环境、提升作物品质，加强对抗病以及防病的效果[9]。光合细菌能降解有机物，并产生各种B族文生素、泛酸、氨基酸、辅酶Q、5-氨基乙酰丙酸（ALA）卟啉类化合物、植物激素（如IAA,GA3、乙烯、细胞分裂素）和抗病毒因子等大量生物活性物质。这些物质能激发植物细胞的活性，提升植物的光 合作 用的反应速率和SOD、POD和CAT活性，从而使植物的抗逆性增强[10-13]。本文采用了大豆作为研究材料，研究了复合光合菌剂与四溴双酚A复合处理对大豆幼苗生长指标和抗氧化酶系的影响，探求复合光合菌剂对四溴双酚A毒害大豆幼苗的缓解作用，为在农业生产中合理的施用菌肥提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试大豆品种：中科-31号，由周口农科院提供。
光合细菌(PSB)培养基：MM培养基添加0.15% 酵母膏 [14]。
供试复合菌剂：复合菌剂PS21是由本实验室经前期试验具有抗逆性和促生作用的光合细菌菌株AR12、AR13复配菌剂。经 初步鉴 定分别为红 假单 胞菌属（Rhodopseudomonas）、红 螺菌 属(Rhodospirilum）。
供试药剂：四溴双酚A，购于Aladdin chemistry co. ltd。
1.2 复合光合菌剂的制备
将光合细菌AR12、AR13分别接种在PSB液体培养基中，厌氧条件下，28℃，100 µmoL•m-2•s-1光照条件下，培养7d，然后离心(5,000×g，50 min)，采用分光光度计，于660nm的波长下测量OD值，使用无菌水调配菌液浓度为109 cfu/mL的复合菌剂悬浮液。2种菌按体积比1:1复配成复合光合细菌菌剂PS21，调菌液浓度为107 cfu/mL。
1.3 试验设置与处理
取籽 粒饱 满的大豆种 子，对其使用70％无水乙醇处理1~2 min，0.05％NaClO溶液浸泡10 min，用无菌水反复冲洗。然后将种子放到铺有消毒滤纸的培养皿内，放入少量蒸馏水，放在25℃光照培养箱在黑暗条件下催芽48 h。风干土装入托盘中，试验分四溴双酚A单独处理组、四溴双酚A+复合菌剂复合组，每组分5小组。四溴双酚A单独处理组的1~5 小组分别向装有风干土的托盘中施用不同浓度的四溴双酚A，使四溴双酚A的浓度为0、5、50、100、1000 mg/kg土，然后选取长势一致的种子种在托盘中，每托盘70粒种子；四溴双酚A+复合菌剂复合组的1~5 小组采用与单独处理组相同的处理方法，但分别向上述含不同浓度四溴双酚A土壤中浇灌107 cfu/mL复合菌剂，复合菌剂施量为10 mL，每3天加一次，共浇灌3次。没有加入四溴双酚A的大豆幼苗作为对照。大豆幼苗置于人工气候室内培养，光照时间为12 h/d、昼夜温度25/22℃、相对湿度70%。在大豆幼苗期处理25 d后，取大豆植株同位叶的叶片测定生理生化指标（叶绿素含量、类胡 萝卜素含 量、P OD活 性、SO D活 性、CA T活 性、M DA含 量、可溶 性糖含 量）。
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