图4 PEG模拟干旱对CAT活性的影响 8
图5 PEG模拟干旱对丙二醛含量的影响 9
绪论
在人类遭受的几种主要自然灾害中,干旱可以说处于非常重要的位置。全世界有1/3以上的耕地处于干旱或者半干旱地带[1]。近年来,全球气候不断改变,干旱现象也频频发生,且逐渐变得严重。全世界都正在被水资源短缺的问题困扰着。干旱不仅深深地制约了植物的生长以及发育,同时也对农业的发展有着相当大的影响[2]。全世界每年由于缺水引起粮食的减产而造成的损失不计其数[3]。我国目前正面临着极其严峻的水资源短缺问题。我国有一半以上的国土面积处于干旱或半干旱地带,是联合国列出的13个缺乏水资源的国家之一。这些地带的耕地有一半以上有灌溉困难的问题,即使是在非干旱地区,也经常会受到干旱问题的制约[4]。因此,提高植物的抗旱性,增加植物在干旱条件下的产量以及研究植物的耐旱机制一直受到广泛的关注[5]。论文网
大豆是全球重要的经济油科植物,是植物油以及蛋白饲料的最大来源[6]。大豆的根系不发达,因此对水分的需求较大,对土壤中的水分异常敏感[7]。干旱对大豆的高产和稳产以及大豆的品质都有很大的影响[8]。研究表明:干旱情况下,大豆的很多生理指标都有明显改变。干旱条件下大豆可以积累可溶性糖等渗透调节物质来帮助自身缓解干旱,并通过一些保护性酶如CAT来清除生物自由基,抵制干旱带来的氧化损害[9]。聚乙二醇-6000(PEG-6000,下面直接称PEG),是一种惰性高分子聚合物并且亲水性相当高。PEG是一种比较常见的渗透调节物质,经常被用于模拟干旱的胁迫。PEG也因此而经常被用作研究植物抗旱机理和抗旱性能评价的一种引发剂[10]。本实验通过不同浓度的PEG6000模拟干旱胁迫,探讨大豆在不同程度的干旱胁迫下,体内渗透调节物质与过氧化物质活性的变化。找出大豆在干旱环境下的响应关键时期。为研究大豆的抗旱性与品种的鉴定与筛选做了铺垫。
1. 材料与方法
1.1. 实验材料
实验大豆是由种子直销店购买的优质黄种皮大豆。首先要挑选出长相饱满,大小基本一致的大豆。
1.2. 实验设计
将挑选出来的大豆种子放在水里浸泡半天,保证种子吸收足够的水分,将水轻轻倒出,大豆种子移入准备好的小盆,依次铺平,并用纱布盖住,置于光线充足的地方。保障种子的水分适中,同时保障种子足够透气。每天用流水冲洗三次,等待种子萌发。文献综述
将已经发芽的种子移入透明的塑料杯,盖上一层石英砂,石英砂占1/3塑料杯,确保种子埋入石英砂。倒入足够水,保证大豆种子生根。用大塑料杯套在小塑料杯上,再在大塑料杯的杯底戳几个小洞。多余的水就会沿着杯底流入小塑料杯,保证水分含量适中,等待叶片长到足够高度。分别倒入完全营养液,继续培养七天:
用浓度分别为5%,10%,15%,20%,25%的PEG进行干旱胁迫处理。第1天、第5天、第9天测量各项生理生化指标。
1.3. 测定方法
1.3.1 可溶性糖含量测定[11]
采用惠酮比色法。取0.3g大豆叶片于试管中。添加10ml蒸馏水,封口。沸水中提取30min,提取过滤液。过滤液倒进25ml容量瓶中并反复洗涤、定容。向试管中加入0.5ml样品液与1.5ml蒸馏水。取1ml加5ml惠酮试剂,混匀,做三次。室温下等待显色。10min后在620nm处检测吸光度。