抑郁症是一种常见的心理疾病，影响着全球约1。21亿人，造成了极大的社会和经济压力。之前研究发现长期的压力是造成抑郁症等神经精神疾病的风险因子[7]。为了研究压力响应的机理，之前研究已经开发出多种长期压力动物模型，包括长期轻微压力模型（chronic mild stress model）、捕食压力模型（prey and predator stress）、入侵者压力模型（intruder stress）和剥夺睡眠压力模型（sleep-deprivation stress）[8-11]。这些压力模型都有自己独特的优点，但因为一些原因，并没有被普遍地使用。相对的，由于束缚压力模型（chronic restraint stress）的实验过程比较简单，它在急性和长期压力研究中被广泛使用。为了实施长期束缚，实验动物要被放进一个大约其身体大小的设备中，每天束缚一到数个小时，并且该过程会重复很多天[12]。由于很多关于长期束缚压力模型的研究都是在大鼠上进行的，关于长期束缚压力对于小鼠的影响的研究很少，所以我怀疑这种压力模型是否真的可以造成小鼠抑郁。之前有研究发现，每天给小鼠进行2小时或者8小时的束缚压力，并持续14天，可以造成焦虑和抑郁行为。但是如果减少束缚压力的持续天数，则不能产生焦虑和抑郁行为。这些结果说明束缚压力重复的天数，比每天压力持续的时间以及束缚压力的总时间长度重要。论文网

长期束缚压力会诱导抑郁症的产生，5-羟色胺神经元系统的破坏也可能造成抑郁症，我们猜测也许5-羟色胺神经元可塑性在这一压力诱导抑郁症产生中发挥着一定的作用。NMDA受体（N-methyl-D-aspartate receptors）是一类谷氨酸受体，被认为是诱导神经可塑性的关键突触成分[13]。NMDA受体通道的打开，需要满足两个条件：一个是突触前的活化，需要轴突末梢释放的谷氨酸；另一个是突触后的活化，需要释放Mg2+造成的去极化[14]。活化的NMDA受体允许钙离子流进入突触后细胞，最后导致突触的改变。长时程增强（long-term potentiation）会增强突触的效率，改变神经元的可塑性，它的发生需要NMDA受体的活化来诱导[15]。功能性NMDA受体是一个由两个连接甘氨酸的NR1亚基和两个连接谷氨酸的NR2亚基组成的异四聚体[16]。NR1亚基是功能性NMDA受体的重要组成部分，选择性敲除NR1亚基可造成NMDA受体失活，进而破坏神经元的可塑性[17]。

1  材料与方法 

1．1 实验材料 

1．1．1 动物材料

实验用小鼠品系是C57BL/6J，验证长期束缚压力是否可以建立抑郁模型时，使用了基因型为Vglut2-cre-的小鼠。验证5-羟色胺神经元可塑性与抑郁症之间的关系的实验中，使用了基因型为Pet1-cre-/NR1-flox-/-和Pet1-cre+/NR1-flox-/-的小鼠，通过基因型为Pet1-cre的小鼠与基因型NR1-flox-/-的小鼠交配产生。

1．1．2  抗体   

Anti-5-HT(Goat polyclonal, 1:250,ImmunoStar,20079)、Cyanine CyTM3-conjugated secondary antibody(Donkey, Polyclonal,1:500,Jackson,705-166-147) 

1．2  实验仪器

普通光学显微镜及荧光显微镜

扫描电子显微镜（Olympus VS120）

冷冻切片机（Leica CM1950）

1。 3  实验方法

1。 3。1 小鼠的饲养与管理

小鼠被饲养在鼠房中，两只小鼠一个笼子，小鼠可以自由地摄取食物和水，温度控制在21℃，鼠笼通风良好，保持12h的昼夜循环，早上7点到晚上7点为昼，晚上7点到第二天早上7点为夜。所有的行为学实验都在白天进行。

1。 3。2小鼠心脏灌流及固定脑组织

实验目的：固定神经系统，防止其变性。