以前人们对β-葡聚糖的提取方式[2],主要是用膜分离技术和加入萃取剂提取。实践表明这些原始方法实际上存在着明显的不足。目前,国内外酵母抽提物研究工艺都已经非常成熟。大量的文献资料主要是有关于破壁处理、添加自溶促进剂、外加酶或几种方法的联合等手段来提高得率和缩短自溶过程的研究工作。
郝勇等[3]运用添加萃取剂来从谷物麸皮中提取β-葡聚糖。第一步将谷物麸皮且与水混合后,分别采用碱液,淀粉酶提取,第二部采用离心分离技术:在上清液中加酸进行沉淀,分离并除去蛋白质,用卷式膜浓缩;再用质量浓度为10%~60%的硫酸铵沉淀,待沉淀稳定后,将沉淀物溶于水中,充分混合,再倒入卷式膜进行浓缩,浓缩后进行喷雾干燥或冷冻干燥,从而提取出β-葡聚糖物质,最后算出β-葡聚糖提取率。
Masler等[4]报道了酸碱处理制备β-1,3-葡聚糖的方法。后来Williams等做了一些完善。后来Kogan,Machova等许多国外学者对此法做了进一步完善修改。chung等研究了如何改进二步碱处理工艺具体操作如下:将80g酵母细胞浸泡在1000ml的水中,待悬浮后,在95摄氏度高温下静置1小时,而后用离心机离心,离心后置于2000ml 3%溶液中(此时溶液汇中有不溶物悬浮),再置于75摄氏度的温度下3小时,再次离心,会看到蒸馏水中有悬浮不溶的物质,现在添加蒸馏水至100ml,用盐酸调节PH值,当PH值=7时进行保温、离心分离,然后水洗,再进行脱水和干燥。注意事项:酸碱结合法制备β-1,3-葡聚糖时,如酸碱使用量较大,对环境污染极其严重,由于工艺繁多琐碎,劳动力的强度大,并且β-葡聚糖的纯度和收率,得率普遍很低,因此该法一般不被采用。
谭斌峰等[5]在曾经的一项发明专利里的一种提取β-葡聚糖的提取工艺中采用的方法是用原料的预处理,将异丙醇和石油醚按照1/4,3/4的比例充分混合,将粉碎后的莜麦麸进行回流脱脂的操作,再在60-70℃的条件下用85%-90%的乙醇溶液对原料进行灭酶操作,时间范围在3-4h之间,选用脱脂灭酶后的莜麦麸为提取原料,加入料液比为1∶7到1∶10的淀粉,在水浴条件65-75℃,提取30-50min,加入淀粉酶去除淀粉,再用碘液定性检测淀粉直至不变蓝;将pH值调整到8。0-9。0范围内,然后继续进行提取步骤;取上清液备用、准备离心分离;待去除蛋白、醇后,取离心分离后的上清液,再将其pH值调节至等于4。5,再静置离心1-4h ;调节pH为7。0,浓缩,边搅拌同时加入65~75%的乙醇,静置离心1~5h。
李祥[6]等人采用的是酸法提取葡聚糖,称取干燥后的啤酒酵母渣样品,再加入0。5mol/l的乙酸溶液,使其在50℃条件下3h充分反应,用离心法处理沉淀成分,再水洗两次,用无水乙醇洗涤脱色,再用喷雾干燥即可。不过该手段得到的是酸不溶性葡聚糖,多糖得率比减法高,产品中蛋白质、甘露糖等杂质较多,需进一步纯化,但工艺就较为复杂,成本高,所以不太推崇该法。
廖先燕等[7]采用碱提取工艺,首先取啤酒干酵母,加入1mol / l氢氧化钠溶液,在90℃的高温水解反应3h,然后将水解产物过滤,再将沉淀物洗涤两次,然后分别,喷雾干燥。结果表明,最佳条件为:第一条件为3%的氢氧化钠,用量为6v / w(液固比),反应温度为75℃,动作时间为3h;第二个条件,3%,4v / w的量,作用温度100℃,作用时间2h。方法是碱溶性葡聚糖产率低,虽杂质较少,但是对环境造成的污染是较大的,能耗也是比较高的。需要谨慎使用。文献综述
张凯诚等[8]采用超声波提取具体实验程序如下,称重100g啤酒酵母泥,加入50ml蒸馏水,用功率为40%的超声波进行其处理,温度保持在20℃,冷却至室温,在4000r / min的条件下离心沉淀15min,然后用蒸馏水洗涤沉淀物,洗涤之后用无水乙醇和无水乙醚分别进行脱色和脱水的操作,最后置于37℃的温度下干燥12小时,得到产物。实验结果表明,超声波提取葡聚糖操作简单,实验成本低,提取产量高。并且废液不含酸碱,环境污染小。但是产品的纯度不高。