摘 要以桑葚为材料,将桑葚反转录获得 cDNA,再从基因组中扩增出约 1000bp 的白藜芦醇 合成酶基因的保守序列,该序列与已发表的来源于桑叶的 STS1 推导的蛋白序列极为相 似。由此推测目的基因是 STS1 基因的片段,该基因与查儿酮合成酶和在起源上有一定关 系,其遗传距离最大不超过 0。12,说明了白藜芦醇合成酶基因家族编码区较保守,保证 RS 能翻译出正确的氨基酸。它们都是由两个亚基组成,分子量在 43-26KDalton 之间,并且都 是由 4-香豆酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 作为底物,二者在结构和功能上有紧密联系。CHS 和 RS 之间有较高相似性,STS 是植物类型Ⅲ聚酮合酶超家族成员之一,其基因及蛋白一 级结构序列具有较高的同源性,是白藜芦醇生物合成的关键酶和限速酶。82342

毕业论文关键词: 白藜芦醇合成酶;反转录;同源性

Abstract cDNA is obtained from mulberry by RT-PCR。Then a conserved fragment of 1000bp characterized to be resveratrol synthase gene is amplified from this genome。The amplified sequence is extremely similar to STS1 which is reported from mulberry leaf。 Because the maximum genetic distance is not more than 0。12,the obtained gene has arelewant relationship with chalcone systhase in origin。It also demonstrates that the coding region of resveratrol synthase gene family is conversed to make sure that RS can translate to the correct amino acid。They are closely linked both in structure and function because of two similar subunits,molecular weight of 43-26KDalton and same substrate of 4-coumaric coenzyme A and malonyl coenzyme A。The CHS is highly similar with RS and STS is a member of the Polyketide synthases superfamily belonging to type Ⅲ。The STS gene and primary structure of its protein have ahigh homology and it is the key enzymes and rate-limiting enzyme for resveratrol biosynthesis。

Keywords:Resveratrol synthase; reverse transcriptase; homology

目录

第一章 绪论 1

1。1 概述 1

1。2 白藜芦醇的理化性质 1

1。2。1  稳定性 1

1。2。2  异构体 2

1。2。3  白藜芦醇生物学特性 2

1。3 白藜芦醇在植物中的来源 3

1。4 白藜芦醇的药理作用 4

1。5 白藜芦醇从植物中提取的方法 5

1。6 RS 基因在植物中的转化及相关代谢产物 5

1。6。1 RS 基因的克隆及转化 5

1。6。2 转 RS 基因植物中的相关代谢产物 6

1。7 转 RS 基因植物的表型和功能 7

1。7。1  抗病原菌活性 7

1。7。2  抗自由基活性 9

1。7。3  花青素着色改变和雄性不育现象 9

1。8 研究目的及意义 10

第二章 材料与方法 12

2。1 实验材料 12

2。2 实验试剂 12

2。3 实验仪器 12

2。4 实验方法 12

2。4。1 桑葚总 RNA 的提取 12

2。4。2 RNA 逆转录成 cDNA 13