首先对实验材料山奈进行预处理,在50℃的条件下,于烘箱烘48h至完全干燥,然后用粉碎机粉碎,收集粉末与广口瓶中,将其放置在阴暗的环境下储存,以备后续实验所用。
精确称取2.0g粉碎好的山奈粉与烧瓶中,加入一定量、一定浓度的乙醇,在已经设定好条件的超声波提取仪中,提取一定时间,收集液体,在6000r/min的条件下离心15min,收集上层清液100ml容量瓶中加蒸馏水定容。文献综述
测吸光度前的显色处理:取上述处理好的试剂5ml于50ml容量瓶,再加0.1mol/L的三氯化铝溶液2mL和1.0mol/L的醋酸钾溶液3mL,用蒸馏水定容,振荡均匀,在阴暗的环境下显色20min,然后在421nm处测定吸光度。
2.3.1乙醇提取法
按照一定的料液比,将样品置于一定浓度的乙醇中,然后再一定温度的条件下搅拌,然后再经过滤、浓缩、萃取和结晶得到纯品。此种方法提取周期长,效率低,时间长,要求温度高。
2.3.2超声波萃取法
利用超声波的空化作用加速植物中有效成分的浸出萃取。与水煮、醇沉工艺相比,超声波萃取具有如下突出特点:超声波能促使植物细胞地破壁,提高疗效,萃取效率高,萃取充分,萃取量是传统方法的二倍以上。据统计,超声波在65~70C工作效率非常高。而温度在65C度内中草药植物的有效成份基本没有受到破坏。超声波提取法具有广谱性,可供选择的萃取溶剂种类多目标萃取物范围广泛。减少能耗萃取工艺成本低,综合经济效益显著。
2.3.3水提醇沉法
一般操作过程是:将中药水提液浓缩至1︰1~1︰2(ml︰g),药液放冷后,边搅拌边缓慢加入乙醇使达规定含醇量,密闭冷藏24~48h,滤过,滤液回收乙醇,得到精制液。浓缩的药液冷却后方可加入乙醇,以免乙醇受热挥发损失。选择适宜的醇沉浓度。慢加快搅。应快速搅动药液,缓缓加入乙醇,以避免局部醇浓度过高造成有效成分被包裹损失。密闭冷藏。可防止乙醇挥发,促进析出沉淀的沉降,便于滤过操作。洗涤沉淀。来.自>优:尔论`文/网www.youerw.com
2.3.4酶解重结晶法
一种生产工艺简单,原料利用率高,生产成本低,产量大,周期短,易于实现工业化的山奈酚提取工艺。此方法工艺①碱提将原料粉碎,加碱液溶解,沸水浴加热提取,冷却,得提取液;②酶解将提取液调酸至弱酸性,过滤,加入原料质量0.5的酶,搅拌加热到50°C水解15到20小时,得水解液;③萃取将上述水解液浓缩至原体积的1/101/15,加乙酸乙酯搅拌萃取,酯相减压回收乙酸乙酯,得浸膏;④重结晶浸膏用甲醇重结晶3次,得黄色针状结晶产品。