2。4。1 菌株培养 9

2。4。2 菌株放大培养 9

2。5 内生真菌发酵液提取分离 9

2。5。1 代谢产物提取 9

2。5。2 代谢产物分离 10

3 实验步骤 11

3。1 内生真菌鉴定 11

3。2 目标菌株筛选 12

3。3 目标菌株来自优Q尔W论E文R网wWw.YouERw.com 加QQ75201.8766 放大培养 12

3。4 目标菌株发酵液代谢产物提取 12

3。5 目标菌株发酵液代谢产物分离 12

4 实验结果 15

4。1 菌株鉴定结果 15

4。2 目标菌株筛选结果 17

4。2。1 代谢产物含量测定 17

4。2。2 代谢产物丰富度测定 17

4。2。3 抗菌活性初筛定 17

4。3 单体化合物结构鉴定 18

5 结论与讨论 19

参考文献 19

致谢 20

附录：化合物BS-3-1的NMR谱 20

引言

白芍研究概况

白芍为毛茛科植物白芍 Paeonia lactiflora Pall。的去皮干燥根，药材主产于浙江、安徽、四川等省。是浙江省的道地药材，为浙八味之一。性微寒，味苦、酸，归肝、脾经。具平肝止痛、养血调经、敛阴止汗之效。用于头痛眩晕、胁痛、腹痛、四肢挛痛，血虚萎黄，月经不调， 自汗，盗汗[1]。白芍含多种化学成分，高小荣[2]等对白芍的化学成分按结构类型进行了分类和汇总，主要有单萜及其苷类、三萜类、黄酮、鞣质、多糖、挥发油等。以单萜及其苷类成分发现最多，包括芍药苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷、苯甲酰羟基芍 药苷、芍药内酯苷、paeoniflorigenoe、β-10-蒎烯基-β-巢菜苷、白芍苷 R1、lactifloin、lactinolide、paeonilactinone、6-O-β-D-glucopyranosyl-paeonisuffron 等 20 多种，其中多个化合物的结构都与芍药苷有关。此外尚有氧化芍药苷、乙酰芍药苷、没食子酰基芍药苷、芍药苷亚硫酸酯和 4-0- 乙基芍药苷、1-0-β-D-glucopyranosyl-paeonisuffron 等。现今分离得到的三萜类成分多达 10 余种，主要有常春藤皂苷元、30- 降常春藤皂苷元、白桦酸、23- 羟基白桦酸、齐墩果酸、11α，12α-epoxy-3β，23-dihydroxyolean-28，13β-olide 等。目前报的黄酮成分仅有山奈-3-0-β-D-葡萄糖（kaempferol-3-0-β-D-glucoside) 和kaempferol-3， 7-di-0-β-D-glucoside。白芍中还含有多种金属元素，例如锰、铁、铜、镉等；此外，尚含有十几种氨基酸成分[3-4]。白芍具有抗炎作用，保肝作用，镇痛、镇静、抗惊厥作用，免疫调节，改善血液流变学等药理活性，尤其从中分离获得的芍药苷，具有治疗老年痴呆的活性，引起广泛的研究兴趣。论文网

内生真菌研究进展

内生真菌是指那些在其生活史中的某段时期生活在植物组织内，对植物组织没有引起病害症状的真菌[5]。人们对植物内生真菌的研究最初始于黑麦草(Loliu¬m te¬m¬ulentum L。)等牧草上产生生物碱类毒素引起家畜病害的内生真菌[6]。1993 年，Stierle[7]等从短叶红豆杉 Taxus brevifolia Nutt 中分离得到一株能产生抗癌物质紫杉醇的内生真菌 Taxomyces andreanae，从这之后学者们越来越感兴趣于那些生活在健康的植物组织内的植物内生真菌的研究，陆续从植物内生真菌的代谢产物中分离出具有抗肿瘤、抗菌、抗氧化、杀虫等生理作用的活性物质[8]。研究过程中发现，内生真菌在演化过程中与宿主植物形成互利共生关系：一方面内生菌可以从宿主植物中吸收营养，并得到保护；另一方面，内生菌能够产生一种或多种促进宿主植物生长发育，增强宿主植物对生物胁迫（食草动物、昆虫、病原菌）及非生物胁迫（高温、干旱、高盐等）的抗逆性[9]。通过研究发现，植物内生真菌可以产生丰富的并且具有生物活性的次级代谢产物。通过对内生真菌次级代谢产物具体化学结构的进一步研究发现，活性代谢产物的结构类型也具有多样性，主要有：萜类、生物碱类、醌类、黄酮类、异香豆素类、内酯类、木脂素类、酚类、多肽类、甾体化合物等[10]。且近年来植物内生真菌受到越来越广泛的关注，尤其是药用植物内生真菌的关注度更高，加强对药用植物的研究以及利用，具有良好的实用性和可行性。文献综述