目前国内对白芍内生真菌代谢产物的研究甚少。而白芍作为有名的浙八味之一,其代谢产物具有丰富的研究价值,因此本实验选择药用植物白芍内生真菌作为研究对象。
前期基础
前期实验中,通过对白芍根部消毒处理,分离纯化得到45株内生真菌,经过形态学检测去除重复菌株,进一步通过ITS序列测定,鉴定为6种属种:柱孢属(Cylindrocarpon sp。)BS-2、菜豆壳球孢(Macrophomina phaseolina)BS-3、角担子菌属(Ceratobasidum sp。)BS-24、立枯丝核菌属(Rhizoctonia sp。)BS-36、小球腔菌属(Leptosphaeria sp。)BS-41、赭绿青霉(Penicillium ochrochloron)BS-42,其中柱孢属(Cylindrocarpon sp。)为优势菌群。通过代谢产物含量及丰富度测定、抗菌活性测定筛选菌株,角担子菌属真菌(Ceratobasidum sp。)BS-24为目标菌株,放大培养获得发酵液和菌丝体。对两者采用有机溶剂萃取,低温浓缩获得代谢粗产物,通过薄层层析法、中压液相层析、凝胶柱Sephadex LH-20、制备薄层色谱、重结晶等多种分离手段对代谢产物进行分离,获得单体化合物。对分离纯化的单体化合物通过核磁共振、质谱等方法进行现代波谱解析,最终确定其化学结构。