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2.5 PSPC对小鼠肝脏炎症蛋白表达的影响 6
3 讨论 7
4 致谢 9
参考文献 9
引言：
自上世纪80年代，花青素引起了研究者广泛的兴趣，主要着眼于花青素的分离提纯等工艺。近年来，随着大众的健康意识日益增强，及对花青素研究的深入，其生理活性的研究成为了热点。紫甘薯花青素（PSPC），是从紫色甘薯块根中浸提的天然食用花青素类色素，属于类黄酮化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤及抗突变等生理功能。
抗氧化活性是花青素类色素一项显著的生理功能。自然界中的花青素以花色苷的形式存在，包括酰基化花色苷和非酰基化花色苷。在花色苷中起抗氧化作用的主要活性基团是酚羟基，它不仅能和蛋白质结合防止过氧化，而且还能切断脂类氧化的链式反应，防止脂质过氧化[1]。研究表明，大多数酰化的花色苷都具有同A2生育酚一样强的抗氧化活性[2]。对比从不同颜色薯肉中提取出的21种醇提物，紫色甘薯花色苷具有最强的抗氧化作用[3]。体外实验的研究结果显示, 紫色甘薯花色苷表现出相当强的还原力和清除羟自由基的能力,且与其浓度呈正比[4]。
大量研究证明，PSPC对肝脏损伤具有保护作用[5-8]。PSPC能明显降低四氯化碳处理大鼠血清中的AST、ALT活性，并对血清、肝脏中的硫化巴比妥酸(TBA)及氧化脂蛋白的增加均有抑制能力[9]。研究表明，紫甘薯花青素可保护扑热息痛诱导的肝毒性，其机制可能与阻断细胞色素P450 2E1、上调肝脏GSH 水平、清除自由基有关[10]。以紫甘薯花青素提取液治疗糖尿病时，治疗组大鼠肝脏脂肪变性较模型组明显减轻，肝糖原明显增加，结果表明紫薯花青素提取液对肝功能具有保护作用，其机制可能与花青素保护肝细胞膜结构，抑制葡萄糖苷酶活性[11]，同时抑制高糖诱导的肝mtGPAT1激活[12]，并通过蛋白激酶C抑制脂肪合成有关。
肝脏是易受各种致病因子或疾病侵袭的器官，如药物、微生物、异常代谢等均可造成肝脏损伤。已证实，大多数肝脏损伤常伴有炎症反应，可进一步发展为肝纤文化、肝硬化、肝衰竭及癌变等。目前，尽管有多种抗炎保肝药物用于临床，但关于是否使用及如何使用抗炎保肝类药物仍存争议[13]，对于药物种类和疗程选择等具体问题仍缺乏统一认识，存在诸多不合理用药现象。
因此，本课题利用HFD建立小鼠肝脏损伤模型，探讨PSPC对肝脏损伤的保护作用及机制，为治疗各种肝脏炎症，2 型糖尿病及代谢综合征（MS）等提供理论依据；基于紫甘薯丰富的资源、低廉的价格，本课题研究将对推动紫甘薯花青素成为天然的抗炎保肝药物、新型的保健食品及其产业化发展，具有一定的意义。
1 材料与方法
1.1实验材料
1.1.1药品及试剂
紫甘薯花青素（购自青岛鹏远天然色素研究所）：采用高效液相色谱分析主要成分是花青素酰苷和芍药酰苷（＞90%），和其他黄酮类化合物。
ALT、Cu,Zn-SOD测定试剂盒（购自南京建成生物工程研究所），DCFH-DA(购自Sigma-Aldrich)， BCAPTM测蛋白试剂盒(购自Pierce Biotechnology)，蛋白核质抽提试剂盒 (购自Pierce Biotechnology)，NF-κB p65抗体，β-actin 抗体，COX-2 抗体，iNOS抗体，羊抗兔二抗(Cell Signaling Technology, Inc., Beverly, MA, USA). TMB(美国Amresco公司）。
1.1.2实验动物
雄性ICR小鼠(8周龄)，体重为31±2g，购自国家啮齿类实验动物育种中心分公司（上海，中国）。将小鼠在恒温（23°C±1°C），湿度60%，光照/黑暗循环(光照时间为08:30–20:30)环境下饲养，摄食、饮水自由。实验室条件下适应一周后，小鼠随机分为四组（每组10只）。每组连续20周进行以下处理：
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