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    3 实验结果与讨论    13
    3.1 论文标准曲线绘制结果    13
    3.1.1 葡萄糖标准曲线绘制结果    13
    3.1.2 蛋白质标准曲线绘制结果    13
    3.2 浸提绞股蓝多糖正交设计试验结果    13
    3.3 分离纯化绞股蓝多糖研究结果    14
    3.3.1 Sevag法脱蛋白试验结果    14
    3.3.2 DEAE-32离子交换柱纯化试验结果    15
    3.3.3 Sephacryl S-400分子筛纯化试验结果    16
    3.3.4 绞股蓝多糖分子量测定结果    16
    3.3.5 绞股蓝多糖纯度测定结果    17
    4 结论    18
    致  谢    19
    参考文献    20
     
    1 研究背景
    1.1 绞股蓝多糖的简介及来源
    1.1.1 绞股蓝多糖的简介
    常见的植物多糖有茶多糖、枸杞多糖、绞股蓝多糖、银杏叶多糖、海藻多糖、香菇多糖、银耳多糖、灵芝多糖、黑木耳多糖、茯苓多糖等,植物多糖具有明显的机体调节功能和防病作用。现今植物多糖研究日益受到关注,国际科学界甚至提出21世纪是多糖的世纪。科学实验研究显示,许多植物多糖具有生物活性,具有包括免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂[1]、抗辐射、抗菌抗病毒、抗溃疡作用[2]、保护肝脏等保健作用。所以植物多糖早已被广泛运用到医学界、餐饮界等大众生活领域中。
    绞股蓝,又称天堂草、超人参、公罗锅底、遍地生根、七叶胆和七叶参等。主要分布在我国湖南、湖北,云南等省,号称“南方人参”。绞股蓝性寒、甘、微苦,归肺、脾、心、肾经,具有清热解毒,清肺化痰止咳,补气养阴生津,养心安神,固精之功效。绞股蓝基源复杂,在我国、日本和朝鲜及东南亚各国都有分布。在我国、日本和朝鲜及东南亚各国都我国有14种和2变种,其中9种和2变种为中国特有种[3]。绞股蓝中含有蛋白质、脂肪、膳食纤文、碳水化合物、钙、磷、铁、胡萝卜素、文生素B1、文生素B2、尼克酸、文生素C以及多种微量元素等成分。
    绞股蓝为葫芦科绞股蓝属多年生攀缘草质藤本植物,含有多种有效药用成分。尤其是绞股蓝多糖具有复杂而又多方面的生理活性,广泛应用于高血脂、脂肪肝、肥胖、失眠、乙肝、慢性呼吸道炎症的治疗与保健[4]。绞股蓝多糖的药理作用在于它并非直接作用于靶细胞和病毒,而是通过抑制或提高体内的各种酶活性,达到酶调节剂的作用,改善宿主机体平衡,达到恢复和提高宿主细胞生理活性。因此,绞股蓝多糖常被人们称为长寿药草。
    绞股蓝叶中多糖含量为1.78%左右,茎中为0.84%左右。绞股蓝茎、叶中均含有果糖、葡萄糖、半乳糖和低聚糖。叶中的游离糖是茎中的3.6倍。茎、叶多糖的水解产物中均含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖成分。叶中多糖含量是茎中的2.1倍。粗多糖中总糖含量大于8%。平均回收率为97.2%左右[5]。
    1.1.2 绞股蓝多糖的来源
    绞股蓝,又称天堂草、超人参、公罗锅底、遍地生根、七叶胆和七叶参等。主要分布在我国云南、贵州、湖南、湖北、山东等省,喜阴湿温和的气候,多野生在林下、小溪边等荫蔽处。
    绞股蓝多糖是从绞股蓝中分离提出得到的多糖组分。Wang 等对绞股蓝粗多糖(GM)进行分离纯化后得到三个多糖组分: GMA、GMB、GMC。多糖的生物活性与其结构有紧密的联系。通过扫描电子显微镜得到了绞股蓝多糖样品的表面形态扫描图片,经过软件分析,发现GPP1- a(分离得到的绞股蓝多糖中的一种)由任意分布分散的球状颗粒组成,并且这些小球状颗粒又是由直径500-1000nm 的更小的球状颗粒组成。原子力显微镜得到GPP1-a的表面如许多不同大小的云朵,推断这是由不同的多糖链形成的,主链上还有许多高度小于3.98nm的支链,这说明GPP1-a是个多分支的多糖,通过高碘酸氧化、甲基化作用及核磁共振对GPP1-a的结构进行了研究,发现GPP1-a主链是--型-1,4-位相连接的葡萄糖,有三种支链。
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