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2.3 结果与分析 12
2.3.1 液相色谱条件 11
2.3.2 蜂胶HPLC方法的建立及优化 11
2.3.3 溶液的制备 15
2.3.4 方法学验证 16
2.3.5 蜂胶中5个活性成分的含量测定 19
3 总结与展望 21
致 谢 23
参考文献 24
1 研究背景
1.1 蜂胶活性成分研究的意义
对于西方国家来说，蜂胶一直都是一种药品和保健食品，并一直为人们所使用。3000多年以前，古埃及人早就察觉到了蜂胶具有优秀的防腐效果，且将它与香料等一同用于木乃伊的制作上，以减少木乃伊腐烂程度。根据在学者亚里士多德所著的《动物志》中所记，蜂胶可被用于改善皮肤病恶化，可用来改善化脓性溃疡、创伤感染等程度。
由于中华蜜蜂不产蜂胶，因此我国对蜂胶的认识和应用相较于其他国家较为滞后。相比之下，国外学者对于蜂胶的研究却一直以来都没有间断过，他们对于蜂胶的物理化学成分、药理作用、临床研究等均做了大量的工作，并已从蜂胶中成功分离得到了300余种化合物，并且每年都有新成分被陆续发现。由于蜂胶所具有的良好的药理活性，蜂胶已成为农学、理学、工学等研究者们研究和开发的热点。我国是直到2005年，蜂胶才正式作为新增品种列入我国药典一部成为法定药材，并且药典并没有关于蜂胶制品的相关标准。
可见对蜂胶软胶囊的研究和开发对于理论研究和实际生活都具有重要意义。其一，虽然目前我国的蜂胶产量稳居世界前列，但是针对中国蜂胶的研究相对较少，尤其是对于蜂胶制品的质量控制以及药动学研究更少，因此本次实验针对蜂胶软胶囊产品进行研究很有意义。其二，我国蜂胶类剂型品种繁多，没有一个行之有效的行业规范来较为全面的限制蜂胶有效成分最低含量，蜂胶产品质量良莠不齐。为了节约成本，现如今有很多不法商贩人为添加黄酮类物质到蜂胶制剂产品之中，更有甚者掺杂杨树胶到蜂胶中伪造成蜂胶毛胶，导致蜂胶类产品质量没有保障。由于国外对于保健品产品有更加严格的控制标准，而我国对于蜂胶软胶囊产品的行业标准较为不全面，我国广大的消费者们更加倾向于购买国外的蜂胶产品。因此，针对蜂胶的活性物质、作用机理、药理活性实验、安全评价等方面的须进行更加深入的探索。针对蜂胶产品的质量标准有待进一步提高，以面对广大的消费者需求和当今市场全球化趋势下的要求。
1.2 蜂胶相关研究现状和发展前景
1.3 蜂胶物理性质
2015版中国药典规定的蜂胶为意蜂采集的植物树脂和蜜蜂蜡腺分泌物经蜜蜂咀嚼混合而成的黏性且具有特殊芳香气的固体胶状物质。其性状为团块或不规则碎块，呈青绿色、棕黄色、棕红色、棕褐色等颜色，表面断面有光泽，且具有特殊香。
1.4 蜂胶化学成分
蜂胶毛胶由50%左右的脂类，35%左右蜂蜡，5~10%花粉、挥发油及其他物质构成。其中，蜂胶由于其特有的的黄酮类、酚酸及其酯类、萜烯类 、脂肪酸、氨基酸等成分而具有良好的生物活性，其中，黄酮和酚酸类的化合物是蜂胶的主要药理活性成分 [4-7]。
1.4.1 蜂胶中黄酮类成分
现今，许多学者们已从蜂胶毛胶中成功分离且准确鉴别得到百余种黄酮类成分。黄酮类化合物随着研究的深入，学者们发现其是蜂胶代表活性物质之一。尤其以白杨素、乔松素和高良姜素为代表有效物质。黄酮类化合物包括：黄酮类、异黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮（醇）类、异二氢黄酮醇类、黄烷类、异黄烷类、査耳酮类等，见表1.1。