紫甘薯花青素抑制肿瘤细胞生长的研究(2)

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2材料与方法 2

2.1 材料 2

2.1.1 器材 2

2.1.2 材料 3

2.1.3 试剂 3

2.1.3.1 RPMI 1640细胞培养液 3

2.1.3.2 0.25%胰酶消化液（50mL） 4

2.1.3.3 PBS缓冲液 4

2.1.3.4 消毒液 4

2.1.3.5 DPPH（0.2mM） 4

2.1.3.6 BHT （抗氧化剂二丁基羟基甲苯） 4

2.1.3.7 -20℃预冷70%乙醇 5

2.1.3.8 PI（终浓度50ug/ml） 5

2.1.4 化合物 5

2.2 方法 5

2.2.1 A549细胞的培养 5

2.2.1.1 A549细胞复苏 5

2.2.1.2 A549细胞培养液的更换 6

2.2.1.3 A549细胞的传代 6

2.2.1.4 A549细胞的冻存 6

2.2.1.5 紫甘薯花青素的处理 6

2.2.2 倒置显微镜下观察细胞生长形态 6

2.2.3 细胞划痕试验观察细胞的迁移情况 7

2.2.4 含紫甘薯花青素的细胞培养液上清氧化活性水平检测 7

2.2.5 流式细胞仪检测细胞周期 8

2.2.6 数据分析 8

3 结果 9

3.1 紫甘薯花青素对体外A549细胞生长的抑制作用 9

3.2 细胞划痕实验观察 PSPC对A549细胞迁移的影响 9

3.3 DPPH自由基清除活性试验测PSPC清除率 9

3.4 细胞周期分布的检测 10

4 讨论 10

谢辞 11

参考文献 12

附录 13

1引言

1.1 肿瘤细胞

肿瘤实质是肿瘤细胞，是肿瘤的主要成分，具有组织来源特异性，肿瘤是一种基因病，但并非是遗传的;它是指细胞在致瘤因素作用下，基因发生了改变，失去对其生长的正常调控，导致异常增生。肿瘤细胞属于异常细胞，死亡速率快于正常细胞，但是死亡速度仍较细胞新生的速度慢，这种不平衡缘于肿瘤本身的基因异常及宿主无法检测和破坏肿瘤细胞。其具有克隆起源、永生性和端粒、基因不稳定性、接触性生长抑制及锚定依赖性生长缺失、不依赖于生长因子和营养物质的进行性增殖、转移等特性。