3结果与分析 11

3.1 超声提取葛根黄酮的实验结果 11

3.1.1 超声时间对提取率的影响 11

3.1.2 超声功率对提取率的影响 12

3.1.3 超声温度对提取率的影响 12

3.1.4 料液比对提取率的影响 13

3.1.5 乙醇浓度对提取率的影响 14

3.1.6 正交优化实验 14

3.2 双水相分离纯化葛根黄酮的实验结果 15

3.2.1 双水相相图 15

3.2.2 双水相萃取能力的测定 16

3.3.1 乙醇/磷酸氢二钾双水相萃取葛根黄酮的最佳体系确定 17

4 结论 21

4.1 超声提取葛根中黄酮类物质 21

4.2 双水相体系的初步分离纯化 21

致谢 22

参考文献 23

1绪论 

1.1 葛根黄酮介绍

黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外，它还常与糖结合成苷。天然黄酮类化合物多以苷类形式存在，并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中，总数大约有4千多种，其分子结构不尽相同，如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。

葛根是多年生缠绕藤本植物，为豆科植物野葛(Pueraraia lobata(wild.)Ohwi)或甘葛藤(Pueraria thomsonii Benth)干燥的根，其甘、辛、性平，具有很多功效，可作为药物应用于多种病症，是一种既有营养又有独特药理作用的药食两用资源[1]。葛根总黄酮是葛根的主要有效成分，约占总质量的10%，葛根总黄酮包括葛根素、大豆（黄豆）甙、大豆甙元等10余种。其中，葛根素在葛根总黄酮中的质量含量最高，具有较高的药用价值。现代医学证明，葛根富含人体必需的8种氨基酸和多种微量元素特别是抗衰老硒元素高达12.5g/100g，具有降低血压、减慢心率、降低心肌耗氧量，扩张冠状血管、改善正常和缺血心肌的代谢，对脑循环、周围血管及微循环的影响，抗心律失常，降血糖降血脂，抗氧化，抗肿瘤，提高免疫力和增强记忆等功能。葛根素[2]是葛根黄酮化合物的主要有效成分之一，其化学名为 4,7-二羟基8-葡萄糖醛基异黄酮，目前多以葛根素作为指标成分反映葛根黄酮的体内动力学过程。

葛根黄酮类化合物的药理作用[2]：近年来，由于脂肪肝等肝脏疾病发病率升高，人们对肝脏的保护研究越来越关注。机体大量摄入乙醇后，在乙醇脱氢酶的催化下大量脱氢氧化，使三羧循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，致使脂肪在肝细胞内积。同时乙醇能激活氧分子，产生氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化及体内还原型谷胱甘肽的耗竭。葛根黄酮对乙醇引起的肝损伤具有保护作用。另有报道，葛根中的葛根素、大豆苷元及大豆苷均可抑制嗜酒大鼠的酒精消耗，大豆甙与酒精溶液同时胃内给药，乙醇血浓度峰值降低且延后，并可以缩短由酒精摄入诱发的睡眠时间；细胞凋亡是一种多基因调控的过程，抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax在细胞凋亡的发生中发挥重要作用。普遍认为，bcl-2/bax之间的比例上调则抑制细胞凋亡，反之则促进细胞发生凋亡，现代研究已证明葛根黄酮有抗肿瘤功效，且研究已揭示葛根总黄酮诱导HL-60细胞凋亡与上调Fas抗原和bcl-2mRNA表达水平有关；葛根黄酮是一种有效的天然自由基清除剂，CuSO4-Phen-VC-H2O2-DNA 化学发光体系中测定其对DNA损伤具有明显的保护作用，通过量效关系的研究确定在0.02～1000g/mL内能有效抑制自由基对DNA的损伤，即葛根黄酮对DNA氧化损伤具有保护作用；研究表明，葛根黄酮具有明显的辐射防护作用，效果明显优于愈风宁心片。葛根黄酮抗辐射作用机制可能与抑制辐射敏感细胞的细胞凋亡和抗氧化作用有关。