表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate ; EGCG; C22H18O11)是提取自中国绿茶茶多酚中的一类儿茶素单体。EGCG具有多个酚羟基结构,因此具有抗氧化能力,可以清除自由基。目前研究表明EGCG能起到抗氧化、抑菌、抗突变、提高免疫力、预防皮肤光老化的作用[17-18]。目前EGCG在医学领域应用较广。EGCG等绿茶提取物中的抗氧化和抗炎多酚可为表皮层最外部的细胞提供能量。因此它具有减少一些紫外线暴露辐射的有害影响的功效[19]。另外有临床研究表明EGCG可以减少乳房癌、前列腺癌的发病率[20-21]。Dale 等人 发现EGCG能通过基因表达,调节细胞周期进程和凋亡,抑制体外宫颈癌细胞生长。已经有研究表明和以前相比,EGCG的作用可能更多的是协同结合了其他儿茶素 [21]。另外,EGCG和其他茶儿茶素可能代谢活化形成更有力和更有效的生物活性化合物。目前以“EGCG”为关键词在Pubmed上可查阅的有关文献有3778篇,其中,超过4000个引用属于EGCG和其他一些在绿茶中发现的天然产物,这些文献可以分为以下几类:绿茶成分的化学分析和表征;使用绿茶产品不同人群的流行病学报告;绿茶儿茶素的抗氧化效果评估;调查绿茶中的儿茶素对特定酶的影响的生化研究和被认为是对各种疾病和化学预防潜在靶分子的生化系统;方法专利等。由此可见,EGCG的解毒效用已获得了国内外研究人员的广泛认可,现已成为抗癌药物的选择之一。论文网

氧化应激作用 (Oxidative stress; OS) 被广泛认为是藻毒素诱导机体损伤的重要原因 [22]。其发生通常都是由于ROS的形成,通过ROS引起脂质过氧化反应。从而导致抗氧化系统奔溃,自由基含量不断上升,引发机体免疫系统损伤,最终引发组织病变或个体死亡。而具有抗氧化能力的物质如EGCG可以清除体内自由基,提高抗氧化酶活性,对机体起到一定的解毒和保护作用。

目前藻毒素研究热点主要集中于微囊藻毒素,节球藻毒素仍然是一类新型藻毒素,相关研究数据有限。由此,NOD造成的健康风险并未形成系统评价。故NOD给生态环境及人类健康所带来的威胁,对哺乳动物的肝毒性效应,分子机制,以及有效的毒性抑制手段等诸多方面应当给予更加全面、深入的关注。本设计目的在于研究节球藻毒素是否可以促进哺乳动物模式生物实验小鼠的氧化应激作用,在此基础上,进一步探究EGCG能否起到助力小鼠抗氧化系统的作用,探讨NOD与EGCG两者对于小鼠肝脏的共同作用。在小鼠实验基础上,提供节球藻毒素的生态健康风险评价,并为抗氧化物质EGCG的效用研究提供研究依据。

1。 材料与方法

1。1 实验材料

实验采用模式生物——ICR级昆明系雄性小鼠。小鼠由杭州师范大学实验动物中心提供,每只小鼠体重为22±2g,健康。小鼠饲养环境:标准饲养笼,通风良好,温度 24℃ ± 2℃,光暗比1:1,食物充足(蛋白质含量16%),小鼠可自由饮水;节球藻毒素 (分子式:C41H60N8O10,相对分子量:824。96) 购自美国 Enzo公司,纯度为95%;天然抗氧化剂EGCG(分子式:C22H18O11,相对分子量:458。38)购自杭州和田生物科技有限公司,纯度为98%;麻醉剂为5%的水合氯醛 (0。4 mL·只-1),购自华东医药;实验中采用抗氧化酶指标的试剂盒均购自南京建成生物科技有限公司,其他试剂为分析纯。

1。2 实验仪器

高速冷冻离心机(Sigma公司);恒温水浴箱(上海精宏);酵标仪(美国热电);可见分光光度计(上海广谱仪器有限公司);匀浆器;超净工作台;高压灭菌锅;烧杯、量筒;移液枪;普通冰箱;制冰机;电子天平;眼科小剪。

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