泰妙菌素 0.01-0.32 0.470 0.162 0.083
新霉素 1.00-32.00 16.638 14.841 9.473
阿米卡星 2.00-64.00 31.013 21.241 14.325
卡那霉素 4.00-128.00 - - -5.796
氟苯尼考 1.00-32.00 5.283 5.992 2.095
恩诺沙星 1.00-32.00 3.307 3.000 -
诺氟沙星 0.01-0.32 - - -
注:“-”表示超出测定范围,即最高浓度不能抑制或仅有最高浓度能抑制藻细胞生长
表2 抗菌药对斜生栅藻的急性毒性
药物 浓度范围/ mg/L 48h EC50 72h EC50 96h EC50
红霉素 1.00-32.00 20.678 10.811 8.272
泰乐菌素 0.20-6.40 3.072 0.591 0.221
替米考星 0.50-16.00 4.574 1.634 0.803
泰妙菌素 0.04-1.28 0.484 0.134 0.276
新霉素 4.00-1280.00 - - -
阿米卡星 4.00-128.00 - - -
卡那霉素 4.00-128.00 - - -
氟苯尼考 0.40-12.80 1.820 1.039 0.649
甲砜霉素 0.40-12.80 9.779 4.897 3.197
恩诺沙星 2.00-64.00 21.789 23.420 17.796
沙拉沙星 2.00-64.00 16.318 19.742 19.144
注:“-”表示超出测定范围,即最高浓度不能抑制或仅有最高浓度能抑制藻细胞生长
即使是同一类药物,对同一种藻的毒性也有差异,如氨基糖苷类中的新霉素对铜绿微囊藻显示一定的毒性,而阿米卡星相对较弱,卡那霉素超出测定范围。这种差异的存在应与抗菌药本身的化学结构和理化性质(如正辛醇/水分配系数、溶解度等) 有密切的关系[19],因为这些特性直接影响药物在藻类细胞内的浓度及其毒性效应的发挥。其次,同一种抗菌药对两种藻类的急性毒性不同,铜绿微囊藻对抗菌药更为敏感,如红霉素对铜绿微囊藻96 h EC50 为0.047 mg/L 对斜生栅藻96 h EC50为8.272 mg/L相差170多倍。其它抗菌药也有类似的现象。这一结果与已有关于抗菌药对藻类的毒性报道相一致,Ha-lling-Shrensen等认为这与两种藻的结构组成不同有关,铜绿微囊藻是淡水蓝细菌的一种,属于原核生物,抗菌药能够较容易地抑制其蛋白质的合成,而斜生栅藻属于真核生物,抗菌药对其抑制需要较高的浓度[19-21]。第三,随着培养时间的延长,抗菌药对藻类的EC50值呈下降趋势,说明在测定时间内,抗菌药对藻类造成的毒性效应程度在加大,藻类暂时还没有对抗菌药产生生物适应。
研究结果得到的各抗菌药对两种藻的EC50值与国外有关报道相比有一定差异,分析原因可能与使用的藻细胞初始浓度的不同有关,该研究中藻细胞的初始浓度为105个/mL,而Halling-Shrensen等和Holten等使用的藻细胞的初始浓度为104 /mL。另外,测定抗菌药对藻类EC50值常用的指标有细胞计数、光密度、叶绿素荧光分析,使用不同的指标所测得的EC50值是不同的。国外目前多采用叶绿素荧光分析法,此研究中应用的为光密度法。由于目前的藻类抑制试验是在一定温度、pH 值、光照强度( 3000- 4000 lx)的液体培养基中进行,在整个测试期间,抗菌药可能会发生降解,包括水解、光解等,所以,严格意义上,藻类抑制试验最终得到的结果可能是药物原形与其降解产物的综合毒性效应。可以看到,许多抗菌药残留在水生环境中的浓度远低于其对藻类产生毒害的阈值,因此研究抗生素对藻类的长期毒性,分析抗生素对藻类毒性随时间而变化的因素(药物的生物降解、自动降解、生物适应) ,以及藻类对抗生素的富集与降解规律,并进而研究抗生素对藻类种群结构的影响,对于全面评价抗菌药的环境安全性来说将更有意义。
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