5

1。3。4 氯霉素类 5

1。3。5 四环素类 6

1。3。6 林可霉素类 6

1。3。7 多肽类抗生素 6

1。4 微藻对抗生素敏感性的研究进展 6

1。5 小球藻的基因工程研究意义 7

第二章  三种抗生素对小球藻敏感性研究实验 9

2。1 引言 9

2。2材料与方法 10

2。2。1藻种及其培养方法 10

2。2。2抗生素来源及配制 10

2。3试验方法 10

2。3。1藻细胞的预培养 10

2。3。2预试验 10

2。3。3敏感性测定 11

第三章  结果与讨论 13

3。1小球藻培养的藻细胞浓度与藻液光吸收值之间的相关性 13

3。2液体培养基中小球藻对3种抗生素的敏感性 13

3。3不同浓度的硫酸链霉素对液体培养中小球藻的抑制效应 16 

3。4结论 19

3。5讨论 19

致谢 21

参考文献 22

第一章  绪论

1。1 选题的目的和意义

近年来,对于微藻的研究变的越来越广泛与深入,更多的科研人员投入到微藻的研究中来,因此论文网随着微藻基因工程的广泛深入探究,微藻利用的相关技术也变的越来越成熟。利用基因工程手段将外源基因导入微藻,可以快速把转化体同非转化体分开,实现高效、快速获得转化体的目的。

小球藻(Chlorella vulgaris)绿藻纲,小球藻科。是一种真核单细胞藻类,细胞成球形或椭圆形,为无性繁殖,第一种人工培养微藻。小球藻具有非常丰富的营养成分和优良的保健效用,且小球藻广泛应用于处理污水、保健食品和水产养殖等方面,被誉为“药物藻类”。近年来,由于微藻生物技术的迅速发展,因其生长迅速、结构简单、又可食用,小球藻已被用作生物反应器服务于各项生产领域。

本实验以构建小球藻基因表达载体为目标,筛选抗生素抗性标记基因。为了确定哪些抗生素能够被小球藻基因改良工程所用,我们利用3种常用的实验用抗生素对小球藻进行抗生素敏感性实验,从而为基因工程改造小球藻奠定基础[1]。

微生物是产生抗生素的主要来源,其中以放线菌产生的为最多,真菌次之,细菌又次之。除此以外,还有其他一些来源,如:植物、动物和海洋生物。抗生素的抑菌作用在人类疾病的预防史上起着至关重要的作用。随着时代的进步,抗生素在水产养殖、水生菌的预防上也渐渐发挥无可取代的作用,但是其抑制菌落生长的机理被应用到在藻类的研究上只有近十年的历史[2]。在藻液的培养中,各类培养基上残留或随着时间增长会受到不同种类细菌的侵染,而在海洋微藻的培养中更是如此,这些海洋细菌与藻类之间有着非常密切的联系,它们对微藻的生长也具有两面性。因此,要将微藻进行改良成生物反应器,在对微藻进行抗生素筛选,同时保证产物不被细菌侵扰与产物的纯度,探寻研究微藻与各类细菌之间的生长关系一直成为了微藻研究重要课题之一,微藻对抗生素的敏感性更是其研究的重点。

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