云实内生菌Chaetomium globosumYSC5次生代谢产物研究(2)
时间:2018-07-11 21:48 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
由此可见，以植物内生菌为资源，由筛选其次生代谢产物的农药生物活性来进一步发现新型农药先导化合物，开发新型生物源农药，有助于许多病害防治，有不可估量的潜力。南京农业大学植物保护学院天然产物与农药化学实验室前期从药用豆科植物云实（Caesalpinia decapetala）叶片中分离获得的对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌等植物病原菌具有抗菌活性的内生菌YSC5，经鉴定为球毛壳菌（Chaetomium globosum），本论文拟采用活性追踪方法分离鉴定其活性次级代谢产物，为发现具有应用价值农药活性的先导化合物提供线索。 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 菌株来源 植物内生菌YSC5来自南京农业大学植物保护学院天然产物与农药化学实验室内生真菌菌种库，测试所用植物病原菌保存于南京农业大学植物保护学院天然产物与农药化学实验室。 水稻纹枯病菌 Rhizoctonia solani 水稻恶苗病菌 Fusarium moniliforme 优尔椒疫霉病菌 Phytophthora capsici 番茄早疫病菌 Alternaria solani 草莓灰霉病菌 Botrytis cinerea 马铃薯干腐病菌 Fusarium sulphureum 油菜菌核病菌 Sclerotinia sclerotiorum 小麦赤霉病菌 Fusarium graminearum 小麦纹枯病菌 Rhizotonia cerealis 1.1.2 培养基 PDA固体培养基：去皮后的马铃薯200 g，切成片状后加入水，再煮沸20 min后通过双层纱布来进行过滤，滤液用自来水定容至1000 mL，分别加入20 g的葡萄糖和琼脂，121 ℃高压湿热灭菌20 min。 PD液体培养基：去皮后的马铃薯200 g，切成片状后加入水，再煮沸20 min后通过双层纱布来进行过滤，滤液用自来水定容至1000 mL，加入20 g的葡萄糖，121 ℃高压湿热灭菌20 min。 1.1.3 主要仪器设备 高压蒸汽灭菌锅 TOMY SX-500 日本 超净工作台 AIRTECH SW-CJ-1F 苏州苏净集团 恒温培养箱 SPX-128 宁波江南仪器厂 摇床 QYC-2102C 宁波江南仪器厂 旋转蒸发仪 EYELAN-1100 日本 核磁共振仪 Bruker DRX-400 德国 质谱仪 Mariner 8304 美国 1.1.4 常用试剂 葡萄糖分析纯（AR）：国药集团化学试剂有限公司； 琼脂粉（Biotechnology Grade）：北京索莱宝科技有限公司； 石油醚 （Petroleum ether）分析纯（AR）：南京化学试剂有限公司； (责任编辑：qin) |