苦参提取液对小麦条锈病菌的抑菌作用(3)
时间:2019-09-24 12:58 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1.3.3苦参提取液对孢子萌发抑制率的测定 采用悬滴法测定苦参提取液对孢子萌发的抑制率[10]：把培养备用的纯化条锈病孢子挑在在PDA培养基上培养7 d，扫落于无菌水中，取水下孢子制成孢子悬浮液（用移液管吸一滴孢子悬液滴于载玻片上[12]，盖上盖玻片后在高倍显微镜下镜检，当观察的视野内出现数个孢子后，此时的浓度就为合适浓度），采用血球计数法将孢子浓度调至1012/mL、108/mL、104/mL、和102/mL个孢子，以水为对照组，反复调整观察，重复三个试验组。取6个载玻片，在各凹面处先滴入1滴不同浓度的制备好的苦参浸提液，再加入制备好的孢子悬浮液5滴，在清水对照物组中加入等量的无菌蒸馏水溶液，待混匀后慢慢盖上盖玻片，在操作中避免产生气泡[4]。将处理好的6组载玻片置于培养皿中，在放入前，先在培养皿底部铺一层用无菌水浸湿的无菌滤纸，然后置于250℃恒温培养箱中培养10-15h后在显微镜下观察孢子的萌发情况[13]。最后观察并计数。反复试验三次，计算平均值。按下式计算抑制孢子萌发百分率[3]： 抑菌率(%)=（对照萌发率-处理萌发率）/对照萌发率×100 (责任编辑：qin) |