基于重叠延伸PCR技术构建APECE058株的基因缺失株(2)
时间:2021-08-25 21:27 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
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表1 本实验中使用的菌株和质粒论文网 菌株/质粒名称 说明 来源 E058 大肠杆菌的野生菌株 本实验室自行分离 E058ΔssrA 大肠杆菌ssrA基因缺失株 本实验室自行构建 E058ΔsmpB 大肠杆菌smpB基因缺失株 本实验室自行构建 DH5α 用于制备感受态细胞 本实验室保存 PKD3 质粒 本实验室保存 1.2 主要试剂 本实验使用的试剂见表2。 表2 本实验中使用的试剂 试剂 外文名称或化学式 来源 酵母粉 YEAST EXTRACT OXOID 胰蛋白粉 TRYPTONE OXOID 氯化钠 NaCl 沪试 琼脂粉 Agar-agar powder 沪试 琼脂糖 AGAROSE BIOWEST 二水合氯化钙 CaCl2·2H2O 上海泗联化工厂 硼酸 H3BO3 北京试剂化学公司 乙二胺四乙酸 EDTA（C10H16N2O8） 上海凌峰化学试剂有限公司 Tris C4H11NO3 Sunshine 甘油（丙三醇） C3H8O3 国药集团化学试剂有限公司 乙酸（冰醋酸） CH3COOH 莱阳市康德化工有限公司 盐酸 HCl 沪试 1.3 需配制的试剂 本实验中需使用部分自行配制的试剂，试剂说明见表3。 表3 自行配制试剂 试剂名称 各组分浓度或配方 LB(高盐) 5g/L YEAST EXTRACT 10g/L TRYPTONE 10g/L NaCl CaCl2溶液 0.1mol/L CaCl2 1×TAE 5.5g/L Tris-Cl 2.75g/L 硼酸 1mol/L EDTA 1.4 使用仪器 本实验使用的仪器见表4。 表4 本实验中使用的仪器 仪器 生产公司 型号文献综述 PCR仪 ABI GeneAmp PCR System 9700 灭菌锅 ALP ALPMC-30S 凝胶成像系统 伯乐 Gel DOX XR System 全温度恒温培养箱 苏坤 SKY-200B 电热恒温培养箱 上海福玛实验设备有限公司 (责任编辑：qin) |