漆酶发酵条件优化(2)_毕业论文

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漆酶发酵条件优化(2)

1.1 漆酶的结构与功能

1.1.1 漆酶的结构

漆酶是一种含五百个左右氨基酸的糖蛋白,其活性中心含Cu+,其中,糖配基是其分子构成的基础,最高可占到80%。所以漆酶的分子量不同,很大原因在于这些糖基的存在。总体来说,漆酶的分子量会因其来源的差异而不同[1]。

带有四个铜原子的漆酶分子量已有120000,其分子构造中含有T1、T2和T3位点能与Cu+结合。根据结合的反应效应分为3种类型:特征吸收峰在614nm处为第Ⅰ型Cu2+,呈蓝色;没有特征吸收峰处为第Ⅱ型Cu2+,为非蓝色;在330nm处有宽的吸收峰为第Ⅲ型,Cu2+为偶合的离子对(Cu+-Cu2+),。

1.1.2 漆酶的功能

能与漆酶结合的化合物很多[2],如O-和P-联苯酚、氨基苯酚、多胺、芳基二胺、多酚、木质素和一些特定的无机离子,并能以活化自由基链化反应从而生成脱甲基、苯酮类物质或者高聚物的聚合等。包括催化反应中只生成苯醌和水如化多酚、多氨基等与对二酚结构类似的底物的氧化。

许多真菌漆酶通过催化反应导致甲氧基酚酸和木质素结构中的甲基脱落,但这不属于漆酶的独特催化反应,其他酶类如过氧化物酶也可发生这样的反应。许多抗坏血酸也能被漆酶氧化。相应反应中氧的消耗快慢被作为验证漆酶活性的方法之一,因为分子氧会被漆酶作为底物结合。文献综述

1.2 漆酶的来源与应用

1.2.1漆酶的来源

生物界中漆酶的存在[3]很广泛,尤其是在我国的特产资源漆树中。至今为止可以确定漆酶在高等植物中比较普遍。

目前为止,已有几千例真菌漆酶的研究,相对微生物中细菌漆酶较多。正是对漆酶的需求加大,加上真菌生产漆酶相对细菌生产漆酶普遍性较大,所以这类研究方向和方法也被广泛借鉴漆树产漆酶中。对细菌产漆酶的优异性,这方面的研究还需要深入。

动物中发现的漆酶相对于植物和微生物来说还比较少。虽然报道中涉及到产漆酶的动物也存在,很多研究人员已在进一步考察研究中,但是其中漆酶的真实性还未被证实。所以应谨慎看待和使用动物产漆酶。

漆酶的来源广泛,研究较多的是微生物液体深层发酵获取漆酶。探索最适宜的方式分离纯化漆酶,以使产漆酶菌在工业中得到高效运用,还需要进一步的探索。在这次实验研究中,重点研究杂色云芝通过液体发酵获取漆酶。

1.2.2 漆酶的应用

漆酶的研究和应用已普及到食品行业、生物造纸、绿色有机物合成、生物检测等多个领域,前景非常大。

食品行业[4]中漆酶主要被用于控制各类饮品的色泽和澄清度上。例如由于氧化作用,原材料中的酚类物质需要消耗能量,而发生浑浊,这一点在对于葡萄酒及果类的新鲜度至关重要。但是,存在一种方法既可以使得葡萄酒氧化性能提高又能使得葡萄酒不因氧化速度过快而不能保持严格的澄清度,就是加入漆酶。这一独特性能在无色酒类生产中效果更为显著。

漆酶广泛用于生物造纸中。由于生物漂白性能[5]优越,越来越受到造纸漂白和衣物漂白领域的广泛关注。根据研究报道,在生产中加入漆酶,纸浆粘度更低、漂白效果更高[6],另外,漆酶可以高效聚合小分子物质,这一方法比化学催化方法更节约成本和能源。因此,漆酶也能高效降解造纸厂工艺用水[7]中的有害物质。 

漆酶能灵敏识别抗原并与之相应结合,同时,能够以相对其他物质更快迅速的识别某些金属离子,而被广泛用于生物检测中,成为一种标记酶[8]。正因为漆酶在生物检测方面具有操作简单、准确度高、稳定性好、测量范围广等无法替代的优异性,至今都被广泛应用。来!自-优.尔,论:文+网www.youerw.com (责任编辑:qin)