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铁皮石斛和金钗石斛杂交后代鉴定(3)

时间:2023-08-20 20:57来源:毕业论文
2。2。2 SSR-PCR 扩增反应 (1)扩增反应体系(表1) 体系组分 浓度 体积(L) ⑵扩增反应程序 PCR体系采用10L体系,退火温度采用引物设计时得到的理论退火

2。2。2 SSR-PCR 扩增反应

(1)扩增反应体系(表1)

体系组分 浓度 体积(μL)

⑵扩增反应程序

PCR体系采用10μL体系,退火温度采用引物设计时得到的理论退火温度,扩增条带清晰明亮、容易分辨的引物用于后续实验;扩增产物条带不清晰,无法辨认,杂带较多的引物则对退火温度进行调整,最终确定最适温度。PCR反应程序为:94 ℃预变性5分钟,32个循环(94 ℃变性40秒,各引物退火温度下复性40秒,72 ℃延伸90秒),最后72 ℃延伸10分钟后4 ℃保存

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