乳糖是一分子葡萄糖和一分子半乳糖经过β-1,4-半乳糖苷键连接形成。乳糖能够诱导里氏木霉产生β-1,4-半乳糖苷酶和纤维素酶[12]，乳糖不能够直接进入胞内，半乳糖苷酶分解乳糖为半乳糖和葡萄糖，胞外乳糖的分解是里氏木霉生产和产纤维素酶的限速步骤[13]。乳糖的诱导能力相当于纤维素诱导能力的三分之一到二分之一，但由于其较低的价格，成为最广泛应用的诱导剂。

2  对里氏木霉产纤维素酶的各种诱导剂的研究

2.1 材料与方法

2.1.1 原料

马铃薯、葡萄糖、琼脂、无菌水、玉米浆、硫酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钾、尿素、氯化钙、硫酸亚铁、硫酸锰、氯化钴、预处理的秸秆、微晶纤维素、乳糖、低聚木糖、3,5-二硝基水杨酸（DNS）、氢氧化钠、酒石酸钾钠、苯酚、偏亚硫酸钠、柠檬酸文献综述

2.1.2 培养基

PDA培养基（固体，液体）

马铃薯葡萄糖培养基是一种用来培养真菌的半合成培养基。此培养基是由马铃薯，葡萄糖，琼脂等组成。其中马铃薯煮汁可以提供碳源，氮源，无机盐和维生素等，葡萄糖主要作为碳源，琼脂为凝固剂。马铃薯的表皮中含有龙葵碱的化学成分，对菌丝生长有抑制作用，所以马铃薯在使用时要去皮。在PDA培养基上大多数真菌都可以良好生长。由于多数真菌喜欢偏酸性环境，而培养基灭菌过程中部分糖类会转化为酸，所以一般不需要调pH值。马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂灭菌倒平板后的培养基24小时后未长杂菌为合格培养基，按无菌操作进行。

在培养基中加入200g去皮马铃薯、20g葡萄糖、20g琼脂，最后定容到1000ml。

在玉米浆种子培养基中加入0.2%的玉米浆、0.14%的硫酸铵、0.03%的硫酸镁、0.1%的葡萄糖、0.2%的磷酸二氢钾，然后分装3ml在15*150mm的试管中，加塞子，120℃灭菌20分钟。

使用以上两种培养基培养里氏木霉种子，培养基制作方法如下：

用电子天平准确量取去皮的马铃薯200g、20g葡萄糖、20g琼脂。将去皮新鲜马铃薯切成1cm3见方的小块，加适量水煮沸20min后，煮至无白心为止，用四层纱布过滤，滤渣继续煮，滤渣最后用纱布包裹，挤干。加入20g葡萄糖、20g琼脂，加热搅拌至琼脂完全融化，并补足水量，加蒸馏水稀释定容至1000mL。

趁热用5000微升的枪移取5mL至大号试管，共装20只，用干净纱布擦去培养基后，再塞上硅胶软噻，分装完毕后将试管全放在大号烧杯中，用铝箔纸包裹好，将剩下的培养基分别装在500mL锥形瓶中，用橡胶塞塞住。分装好的培养基要及时进行灭菌处理，不宜放置时间过久，否则培养基内会长出杂菌。灭菌温度为121℃，灭菌时间30min。

当培养基冷却到80℃左右，即不太烫手时，趁热制作成斜面培养基。一旦冷却凝固后就无法制作成斜面培养基，就需再次加热熔化后，再制作成斜面培养基。

斜面培养基制作方法是：首先在桌面上放置一根厚1cm的木方条，以此作枕，然后将培养基试管上端放在枕木上，试管内液体就自然成倾斜状，如此一排一排的排放放十根，共需两块木板，边排放边调整斜面的长度，以斜面上端距棉塞1cm 左右；下端刚到试管底部为宜，切勿使棉塞与培养基接触，否则棉塞会受潮生长霉菌，经冷却后，就会凝固成斜面培养基。在未凝固之前，不要移动试管，以免斜面培养基变形，制作好的斜面培养基，需在30℃以上放置24-48h ，待培养基上无细菌长出后使用。来!自~优尔论-文|网www.youerw.com 对里氏木霉产纤维素酶的对各种诱导物的研究(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_76914.html