2 实验部分
2.1 实验仪器与试剂
仪器:美国Waters高效液相色谱系统(Waters600 Controller,Waters Delta600, Waters2487紫外检测器,Waters In-Line AF在线脱气机,Empower色谱数据管理系统),电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司,d=0.1 mg),KQ-600超声波清洗器(巩义市英峪予华仪器有限公司),0.2 μm滤膜,25 μL微量进样器,200 μL,1000 μL移液枪,其余为实验室常规仪器。
试剂:维生素E胶丸(0.1 g,威海亚太药业有限公司)做标准品,甲醇(色谱纯,江苏汉邦科技有限公司生产),三种尿素维E乳膏(分别为重庆华邦制药有限公司、上海中华药业南通有限公司、新和成控股集团有限公司生产)。
2.2 色谱条件
PRONTOSIL120-5-C18-ace-APS 4.6 mm×150 mm, 5.0 µm色谱柱,甲醇为流动相,流速为1 mL/min,检测波长285 nm,每次进样量为10 μL。
2.3 溶液的制备
2.3.1 样品溶液的制备
称取三个不同厂家生产的三种尿素维E乳膏适量(重庆华邦制药:0.1489 g、上海中华药业:0.1637 g、新和成控股集团:0.1963 g)置于10 mL的比色管中,加入甲醇5 mL,超声5 min萃取。重庆华邦制药定容至5 mL,上海中华药业、新和成控股集团定容至10 mL,取上层清液,经0.22 μm滤膜过滤后待用。来,自|优;尔`论^文/网www.youerw.com
2.3.2 标准储备液的配制
用天平精确称取0.0241 g维生素E标准品放入10 mL容量瓶中,加入5 mL甲醇后,置于超声波清洗器中超声5 min,取出后用甲醇定容至10 mL,作为标准储备液待用。
2.4 不同提取方法试验
分别用电子天平精确称取质量为0.1 g左右的重庆华邦制药有限公司生产的药膏6份,分为两组。将称取的药膏分别置于10 mL比色管中,加入5 mL甲醇。一组置于超声波清洗器中超声5 min、10 min、15 min,冷却至常温,另一组静置5 min、10 min、15 min,然后都加入甲醇定容至5mL。取上层清液,经0.22 μm滤膜过滤后,在2.2项的色谱条件下用微量进样器进样分析。
3 实验结果与讨论
3.1 标准曲线
用移液枪吸取标准储备液加甲醇溶剂各配制成如下浓度:0.016 mg/mL、0.0481 mg/mL、0.241 mg/mL、0.482 mg/mL、1.205 mg/mL。经0.22 μm滤膜过滤后,在2.2项的色谱条件下进样分析。以色谱峰面积Y对标样浓度X(mg/mL)做标准曲线,如图1所示。得到线性回归方程:Y=1.032×106X-6.95×104,R2=0.999。