摘  要:安琪酵母为材料,用酵母完全培养基(YPD培养基)进行培养。通过划线培养,挑选出单菌落。经过镜检之后,选取活性高的菌株进行扩大培养。对培养至对数期的酵母,分别用重金属离子(1 mmol/L Cu+ 和25 μmmol/L Cd+ 处理,分别处理2 h、3 h、4 h和9 h、10 h、11 h。)和过氧化氢(不同浓度的H2O2溶液)对酵母进行刺激处理,对刺激处理后酵母进行离心破碎,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE电泳)对处理过的酵母所产生的蛋白进行检测。10837
  关键词:酵母培养;氧化处理; SDS-PAGE电泳
Yeast Fes1 protein and the relationship between oxidative stress
Abstract: The experiment use Angel yeast as the material, which was incubated by yeast culture medium (YPD medium). After that, a single yeast colony was sorted out by streak cultivation. Then, a high activity yeast strains was selected under microscope to process secondary yeast propagator. On the train to log phase yeast, respectively, with heavy metal ions (Cu+ and 25μmmol/L 1mmol/L Cd+, 2 h, 3 h, respectively 4 h and 9 h, 10 h, 11 h.) And hydrogen peroxide (H2O2 solution of different concentration) stimulation treatment on yeast, the yeast of stimulus processing after centrifugal crushing, and by using polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE electrophoresis) on the treatment of yeast protein detection.
Key words: Yeast culture; Oxidation treatment; SDS-PAGE electrophoresis
目    录

摘  要    1
引言    1
1. 材料和方法    2
 1.1 实验材料    2
1.1.1 菌株    2
1.1.2培养基和缓冲液    2
1.1.4主要仪器    4
 1.2 试验方法    5
1.2.1 酵母活化    5
1.2.2 酵母菌的初筛    5
1.2.3 酵母菌的复筛    5
1.2.4 酵母菌的鉴定    6
1.2.5酵母菌的扩大培养    6
1.3酵母菌的氧化刺激    6
1.3.1用不同浓度的H2O2溶液对酵母进行刺激处理    6
1.3.2分别用铜和铬两种重金属离子溶液对酵母进行刺激处理    6
1.4酵母菌的破壁    7
1.4.1破壁条件的确定    7
1.4.2酵母菌破壁    7
1.5 SDS-PAGE电泳检测蛋白    7
2. 结果与分析    8
2.1酵母菌的活化结果    8
2.2 初筛结果    8
2.3 酵母菌的鉴定    9
2.4 酵母菌氧化刺激的结果    10
2.5 酵母菌的破壁效果    11
3. 结论及展望    13
参考文献    14
致谢    15                                                                                                                                             
酵母Fes1蛋白与氧化应激的关系引言
     酵母Fes1蛋白的相对分子质量为32,604Da,等电点为4.76 。酵母Fes1蛋白是Hsp70(Ssa1p)核苷酸交换因素,同时是胞质Sil1p同族体,具有防止所需的释放错误折叠蛋白Hsp70 Ub-proteasome机械系统的破坏的功能, 酵母Fes1蛋白也能够增加蛋白质丰度以应对DNA复制 的压力。
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