11

2。1 实验材料 11

2。2 实验仪器 11

2。3 实验方法 12

2。3。1 丝胶蛋白的提取(溴化锂LiBr法) 12

2。3。2 透析袋的预处理 13

2。3。3 丝胶蛋白水凝胶的制备 13

2。3。4 丝胶蛋白水凝胶冻干支架的制备 14

2。3。5  0。01M PBS溶液的制备 14

2。3。6 丝胶蛋白微观结构观察 14

2。3。7 丝胶蛋白水凝胶孔隙率的测定 14

2。3。8 丝胶蛋白水凝胶的吸水性测定 15

2。3。9 丝胶蛋白水凝胶的膨胀动力学分析 15

2。3。10 丝胶蛋白水凝胶的降解动力学分析 15

2。3。10 丝胶蛋白水凝胶的傅立叶转换红外分析 16

2。3。11 丝胶蛋白水凝胶的荧光性质测定 16

第三章  实验结果与讨论 17

3。1 不同交联方式制备的丝胶蛋白水凝胶 17

3。2 丝胶蛋白水凝胶多孔的微观结构 17

3。3 丝胶蛋白水凝胶的FTIR分析 19

3。4 丝胶蛋白的吸水性测试 20

3。7 丝胶蛋白水凝胶的膨胀动力学 21

3。8 丝胶蛋白水凝胶的荧光特性 23

实验结论 26

致谢 27

参考文献 28

第一章 综 述

1。1 组织工程

1。1。1 组织工程简介

组织工程是将细胞生物学、材料科学等工程科学和生命科学等学科的基本原理和方法相结合,进而进行体内或体外组织、器官构建的新型学科,同时也是20世纪80年代兴起的一门新型交叉学科。

1。1。2 组织工程基本原理论文网

从机体获取少量活体组织,将种子细胞从组织中分离出后在体外进行细胞的扩增培养,再将其与生物相容性良好的生物材料(生物支架)按照一定比例混合,使细胞依附于支架上,再将该复合物植入受体的特定部位,在生物材料降解的过程中,依附于其上的细胞不断增殖,最终形成目标组织,从而实现对受损组织的修复与重建。在这一过程的关键在于用于细胞组织培养的生物支架材料的选用。

1。2 生物支架

1。2。1 生物支架的性质

支架材料是组织工程与临床应用的关键。作为细胞培养的微环境,生物支架不仅可以支撑和依附细胞,也为细胞和环境之间的营养和代谢产物的交换提供了适宜的场所。在组织工程中选择优先选择无毒性,具有良好的生物相容性,无排异反应等生物活性的生物支架;一定的孔隙率、优秀的机械强度和良好的表面活性等理化性质,有利于维持依附于其上的细胞的形态并促进其生长;良好的生物相容性和细胞亲和性可以促进细胞增殖,诱导组织再生。

1。2。2 生物支架的应用现状

目前为止,一些天然高分子材料(甲壳素,壳聚糖海藻酸盐、胶原蛋白、明胶、琼脂等)、天然无机材料(珊瑚礁、纤维蛋白等)和合成高分子材料(脂肪族聚酯、聚酸酐、聚醚、聚丁酸等)等生物材料已被应用于组织工程中作为细胞支架。

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