国内外研究表明，人类或动物长期暴露在二甲苯和乙苯的混合物中能引起听力的丧失，接触乙苯或二甲苯的老鼠易产生耳毒性，影响神经系统和呼吸系统功能[2]。甲苯复合物可显著抑制斑马鱼胚胎的正常发育，造成胚胎畸变率、死亡率比例的增加，以及胚胎发育迟缓并出现严重的畸形[3]。但是，对二甲苯对水生生态系统,，尤其是对水生生物早期发育过程中的毒性效应尚缺乏深入了解。

当前，爪蟾研究在生物医学上的应用较为普遍，在医学基础和临床及药物筛选研究中占有重要地位[4]。作为模式生物研究的爪蟾主要有两种：非洲爪蟾和热带爪蟾，它们是亲缘关系相近的两个不同的种。非洲爪蟾胚胎作为模式动物，易于饲养和繁殖，世代周期短，子代多，易于遗传操作，其蝌蚪以及成体均生活在水中，可以很容易的吸收水体中外源性激素或其他化合物等特点[5]。从20世纪50年代以来，非洲爪蟾已经成为发育生物学的良好模型，在胚胎诱导[6]、血细胞发育[7]和形态发生[8]等研究领域的重要模式生物。

非洲爪蟾胚胎致畸实验（FETAX）是检测污染物发育毒性的常用方法[9]。目前，该方法仅用于污染物致畸效应的检测。在很多研究中已经涉及对非洲爪蟾蝌蚪毒理学的研究，例如珠江沉积物中的有机提取物的毒性对非洲爪蟾胚胎的研究，其中就是表明珠江水质中存在毒性的提取物对蝌蚪生长发育产生影响[10]，还有环烷酸也曾被视为有害的环境污染物对蝌蚪生长发育产生严重影响[11]。现阶段大多数研究致力于爪蟾的生物医学效应、毒性效应和胚胎致畸的表型特征等[12, 13]。以此为前提，通过研究环境污染物对爪蟾等两栖动物的毒性效应进而监测环境变化，已成为国内外研究热点，其细胞、组织和生理生化过程都会发生显著差异，进而影响其存活和生长发育，从而在环境毒理学研究中发挥越来越重要的作用。

非洲爪蟾的胚胎还广泛应用在实验室中大脑功能和器官发育的评估[14, 15]。白化的非洲爪蟾是一种透明的脊椎动物模型生物，广泛运用于发育和毒性研究[14, 16]。其胚胎便于质粒注射和体内实时成像技术。爪蟾胚胎致畸实验是一种有效的测定致死因子和潜在的致畸化学物品和药品的生物鉴定法[17]。就我们目前所知，还没有关于爪蟾暴露在PX中产生的对细胞存活和行为的影响的研究，而这个研究对于长期暴露在PX中对神经回路功能和动物行为的影响的研究有重大意义。

另外，免疫组织化学技术以其特异性、敏感性强及操作简便等优点得到了最为广泛的推广和应用[18]。它不仅提高了病理诊断的准确性，也渗透到基础和临床学科中，为疾病的病因、发病机制及科研工作研究提供理论依据。

2 材料与方法

2。1 爪蟾胚胎致畸实验

胚胎致畸实验是用动物检测某种环境污染物（即受试物）对人类是否会引起畸变的一种实验方法。而爪蟾胚胎致畸实验( FETAX )是一种用于检测污染物发育毒性的有效方法。本课题以非洲爪蟾为模式动物，检测PX对其生长发育的毒性作用。使用不同浓度的PX处理蝌蚪，观察蝌蚪的生长发育情况，找到蝌蚪的致死、致畸浓度和时间。

首先选取适宜的雌雄爪蟾，对其进行腹腔注射促绒毛膜性腺激素后，在20℃恒温水箱中，12小时光照，12小时黑暗处理，促进产卵。等成年爪蟾产卵后，转移成年爪蟾，继而对爪蟾胚胎继续进行培养。根据蝌蚪生长变态点决定其胚胎期。待其孵育到期后，用塑料吸管吸出健康蝌蚪至盛有steinberg培养液的玻璃碗中，置于20 ℃恒温培养箱中。

待蝌蚪长到34 - 47期，将其移至分别盛有160 ml的steinberg培养液和浓度分别为1 mM，2 mM，2。5 mM的PX溶液的直径15 cm的培养皿中，进行实验。每组30只蝌蚪，每天更换培养液，观察蝌蚪的生长发育情况，并记录死亡和畸变的蝌蚪只数。