灵芝两阶段发酵研究+文献综述(3)
1.2.2 灵芝三萜类化合物
Kubota T等[7] 于1982年第一次在灵芝子实体中得到灵芝酸A(ganoderic acid A)和灵芝酸B( ganoderic acid B) ，这也是科学家们第一次在灵芝子实体中得出纯的化合物，这也为后来人们在灵芝子实体、孢子粉、发酵的灵芝菌丝体和发酵液中得到160多种化合物做准备。赵明文等[8]在灵芝菌丝体中测定三萜化合物的含量和多糖类化合物的含量，得出的实验结果时：三萜类化合物的含量最高的是韩国灵芝菌种，汉城2号菌种的多糖类化合物的含量最高。余素萍[9]等对国内栽培的主要的灵芝菌株的菌丝体胞内多糖和胞内三萜的产量做了比较，结果显示：菌株G21和G7是灵芝菌丝体胞内含多糖产量最高的，菌株GL31是含三萜产量最高的菌株。
1.2.3 灵芝三萜类特征
三萜类化合物是灵芝中的主要活性成分之一，一般来说它们都具有比较复杂的化学结构，其中分子量多在400-600[10]之间的大多数是高度氧化的羊毛甾烷类的衍生物。根据分子内所含的碳原子数目，将三萜类化合物可分为C24、C27 和C30三大类[10]，根据其含有的官能团和侧链，灵芝三萜类化合物可分为的骨架为15种、侧链是24种[6]。
灵芝中三萜类化合物的15种基本骨架[6]和24类侧链如下图所示：
图1-1 灵芝三萜类化合物的15种基本骨架
图1-2 灵芝三萜类化合物的24类侧链
有图1-1和1-2可得知大多数三萜类化合物中的三萜醇类，三萜醛类及三萜类过氧化物它们的结构中不饱和双键存在于环的△7（8）、△9（11）位，C11位和C23位不存在羰基且环上的取代基减少了；三萜酸的结构则是双键大多位于环上的△8（9）位，多数情况下C3、C7、C15位上有羟基或羰基等取代基[11]。灵芝三萜类化合物的紫外吸收波长比较有规律：第一种类型的化合物是具有△8（9）双键和C11位的羰基，它们的紫外吸收大多在λmax253nm，吸收强度在logε3.8～4.1之间；第二种类型的化合物没有共轭双键、同时也没有α、β不饱和酮[12]，它们的紫外吸收波长在λmax210nm，吸收强度在logε4.2左右[12]。
灵芝中三萜类化合物的红外光谱主要表现在较强的羟基吸收峰；质谱的共同特征是在裂解过程共同失去侧链；三萜类化合物的13C-NMR中主要信号是双键碳原子和连氧碳原子，1H-NMR的主要信号则是双键质子、连氧碳质子及甲基质子[12]。
1.2.4 液体深层发酵技术
查阅相关文献发现，对灵芝子实体中所含的化学成分的种类、含量、药理活性等的研究不是很清楚，有些结果因实验方法的不同而自相矛盾，这对我们合理有效的利用灵芝造成了困难。分析考虑此种状况的因素有两个方面：一是我国灵芝资源丰富，在全国有近100种灵芝属的野生品种，灵芝因品种较多会带来研究结果的差异；二是由于各地气候、栽培环境、栽培方法等的不同可能造成栽培灵芝研究结果的不同，即使是同一灵芝品种由于栽培地点和方式等的不同，灵芝子实体中所含的化学成分含量也会表现出一定的差异。由于人工栽培的灵芝子实体产品品质的不够稳定，对灵芝的研究和相关产品的开发带来极大的困难。 因此人们希望找到一种能够保证灵芝品质稳定的方法，从而有助于将灵芝产品进一步的规范化、市场化、国际化。在逐渐摸索过程中发现与人工栽培获得灵芝子实体相比，采用液体深层发酵技术在生产灵芝原料时不仅可以缩短生产周期、而且能提高灵芝产品稳定性。