不同产地荆芥生长特性和腺毛显微观察研究(2)
1 材料与方法
1.1 材料
荆芥种子分别来源于河南新野、江苏太仓、河北安国、安徽亳州、河南周口和江苏常州，编号分别为XY、TC、AG、BZ、ZK、CZ，经南京农业大学王康才教授鉴定均为唇形科植物荆芥（Schizonepeta tenuifolia Briq.）。选取健康饱满无病害的6个产地荆芥种子，播种于南京农业大学日光温室内，正常水肥管理。
1.2 实验方法
1.2.1 动态生长特性测量与记录 播种一个月后开始测量荆芥株高（主茎子叶节到主茎顶端生长点之间的距离），茎径（株高高度50%处茎的直径）。每个产地5个重复，使用卷尺（精确度0.1 cm）和游标卡尺（精确度0.01 cm）等测量工具，每隔7天测量记录一次6个产地荆芥的株高和茎径，并且记录花期（花穗开花至花穗由浅紫变绿）。
1.2.2 叶绿素含量测定 采用95%乙醇浸泡法[12]。取新鲜叶片4~5片，洗净擦干，去掉中脉剪碎，放入小烧杯，加95%乙醇20~30 ml浸提，并随时搅动。待乙醇呈深绿色、叶片无绿色时，滤除浸提液备用。将浸提液置于比色皿中，设置空白对照，在分光光度计上测定并记录数据。
1.2.3 光合参数测定 选择晴天的上午9:00～11:00，取上层部位的功能叶，采用LI-6400光合仪测定。设定光强800 μmol•m-2•s-1，叶室温度25 ℃左右，相对湿度60～70%，CO2浓度为380 μmol•L-1。测定时叶面朝上，当样品室内CO2的浓度稳定时记录数据。
1.2.4 生物量测定 当花开到顶、穗绿时采收。进行穗数、一级分枝数、二级分枝数、总分枝数和鲜重的测量记录。将称重后的荆芥，置于阴凉通风处干燥数天，待植物完全干燥后称重并记录数据。使用电子天平进行重量的测量。
1.2.5 腺毛显微结构的观察 上午晴天时，取荆芥植株成熟叶片若干，用酒精消毒的单面刀片切下面积为2×5 mm2的无主脉小块，清水漂洗后用吸水纸吸干水分，在4%的戊二醛的溶液中固定，4℃过夜。再经过漂洗、脱水、置换一系列样品处理过程，之后用CO2临界点干燥仪干燥样品，将样品黏贴于镀膜仪样品台镀膜，于扫描电子显微镜下观察。
1.3 数据分析
数据均采用EXCEL2013和SPSS 19.0进行统计与数据分析，采用Ducan法进行多重比较。
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