1。2。3 不同组织部位的继代培养
用消毒后的刀片的将两种丹桂幼胚诱导得到的植株分成苗,子叶,愈伤组织三部分,分别用无菌的镊子将这三部分接入各自的培养基进行继代培养。苗培养的培养配方设计为1/2MS+ 0。25mg/L TDZ,愈伤组织和子叶的诱导培养基都设计为1/2 MS+ 0。5mg/L TDZ + 0。1mg/L NAA,均添加1。0g/L PVP,20g/L蔗糖,6g琼脂,pH值调至5。8-6。2,放在23℃-25℃的培养温度下培养。每天光照14h。培养过程中分别统计平均苗高,愈伤化率以及污染率。每隔40d左右继代一次。继代培养4次后统计幼苗平均高度。文献综述
2 结果与分析
2。1 桂花幼胚离体培养形成苗的过程
未成熟的桂花果实呈绿色(图1,A),秋季开花后开始发育,次年4-5月份成熟,成熟后果实转为紫黑色。桂花种子为有胚种子,刚接种的莲子丹桂及速生丹桂幼胚呈乳白色的条状(图1,B),在培养基上培养30d后,幼胚的下胚轴下端逐渐开始膨大,形成愈伤组织;继续培养,愈伤组织分化,胚芽开始形成幼苗(图1,C)。将得到的幼苗、愈伤组织,子叶分开培养,继代4次以后可得到新的幼苗植株(图1,D)。在后期培养过程中植株出现分蘖。