2。2。2 SSR-PCR 扩增反应

（1）扩增反应体系（表1）

体系组分 浓度 体积（μL）

⑵扩增反应程序

PCR体系采用10μL体系，退火温度采用引物设计时得到的理论退火温度，扩增条带清晰明亮、容易分辨的引物用于后续实验；扩增产物条带不清晰，无法辨认，杂带较多的引物则对退火温度进行调整，最终确定最适温度。PCR反应程序为：94 ℃预变性5分钟，32个循环（94 ℃变性40秒，各引物退火温度下复性40秒，72 ℃延伸90秒），最后72 ℃延伸10分钟后4 ℃保存