于2016年11月初,在每条样带随机选取2m*2m的样方各3个,在样方中随机采集6个土柱(采样深度为0~5cm),分两袋保存,将底泥样品带会实验室。一袋样品称重之后用4%甲醛水溶液固定,用于分离和鉴定土壤线虫;另一袋样品风干、过筛,用于土壤理化性质的测定(土壤含水量采用烘干法测量)。文献综述
2。2。2 土壤线虫的分离与鉴定
土壤线虫的分离采用Ludox TM悬浮法[4]。分离后,在解剖镜下计数,依据土壤含水量将线虫数折算为每100g干土含有的数量;再在每份线虫样品中吸取1毫升含足量线虫的样品(保证有100条以上的线虫),加等量(1毫升)脱水剂(甘油,无水酒精,蒸馏水比例为1:4:5),脱水两周后制片,于显微镜下鉴定至属(每份样品鉴定100条左右)。
对鉴定出的线虫进行以下几种标准的分类:
1)依据线虫的取食食性及食道特征可对线虫进行划分[3,5,7]。以Yeates等(1993)的划分体系[5](一般用于土壤、淡水线虫),将线虫分为植食者(plant feeding)、食真菌者(fungal feeding)、食细菌者(bacterial feeding)、沉积食性(substrate ingesting)、捕食者(carnivores)、杂食者(omnivores)、食单细胞真核生物者(unicellular eucaryote feeding)和动物寄生者生活史中营自由生活阶段(dispersal or infective stages of animal parasites)八大类群;2)依据线虫类群Cp值进行统计,将线虫分为Cp1~Cp5五大类群(由r对策者向k对策者过渡:Cp1,世代极短且卵量巨大,典型机会主义者;Cp2,世代时间短,卵量大,机会主义者;Cp3,世代时间较长,对环境较敏感;Cp4,世代时间长,对环境压力敏感;Cp5,世代时间相对Cp4更长,对环境的污染也更为敏感,卵量小)。
2。2。3 土壤线虫的群落功能结构评价
对土壤线虫的以下几个指标进行计算分析[1,3,4,6,12,14]。
线虫群落生态指数:
1)多样性指数(Shannon index,SI):
H=-∑PilnPi
式中:Pi表示第i个分类单元的线虫个体数占该样品线虫总个体数的比例。
2)成熟指数( maturity index,MI):
MI = ∑vifi
式中:vi 为根据自由生活线虫(植物寄生线虫)在生态演替中的不同生活策略分别赋予的 c-p 值,fi为第 i 种线虫的个体数占群落总个体数的比例