2。2 褐飞虱不同发育阶段体内海藻糖酶活的测定 8

2。3 注射过量糖类物质后褐飞虱体内糖含量的测定 8

2。4 注射过量糖类物质褐飞虱体内海藻糖酶活性的测定 9

2。5 注射过量糖类物质褐飞虱畸形表型观察 10

3  讨论 10

3。1 研究意义 10

3。2 褐飞虱不同发育阶段海藻糖代谢各项生理生化指标 11

3。3 褐飞虱对过量糖类物质的生理应激反应 11

4  结论 12

参考文献： 12

致谢 14

引言

褐飞虱（Nilaparvata lugens (Stål)），属同翅目飞虱科的单食性水稻害虫。它可通过群集在水稻秆和枝叶部吸取其汁液和传播植物病毒，大量褐飞虱在水稻上取食繁殖会造成“虱烧”[1-2]。不仅如此，褐飞虱还具有繁殖快、周期短、抗逆性强的特点,容易在适宜环境中发生毁灭性灾害，造成农作物的巨大损失[3-6]。

水稻（Oryza satrva L。）是我国首要的粮食作物，播种面积和产量均占粮食作物的第一位，多年来经常遭受褐飞虱（N。 lugens (Stål)）的危害。对于害虫的防治，人们多采用传统的单一农药控制害虫的方法[7-9]。然而杀虫剂的不合理使用引发了一系列“抗药性、再猖獗和残留”的“3R”问题。而作为昆虫的血糖——海藻糖Trehalose，一种非还原性双糖，是昆虫血淋巴中的重要能量物质 [10-13]。水稻害虫褐飞虱的各种生理活动都离不开海藻糖。各个组织都能通过海藻糖酶（Trehalase，简称TRE）将其降解成为葡萄糖为生命活动提供能量。故我们可通过影响褐飞虱海藻糖代谢途径来调控褐飞虱数量，从而达到绿色防治害虫的效果。早期许多学者对海藻糖酶、海藻糖合成酶及其对应酶基因等方面都进行了深入的研究，但对褐飞虱海藻糖代谢的具体途径及过量糖含量对海藻糖代谢平衡的影响尚未取得完善的研究成果。因此深入研究褐飞虱各发育阶段糖含量和酶活的代谢情况以及过量糖对糖含量和酶活的影响，有利于探究褐飞虱海藻糖代谢具体途径，也有助于从海藻糖代谢调控入手，为将来发展和生产绿色生物农药防治害虫提供理论依据。

1  材料与方法

1。1 供试水稻及虫源来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766

水稻：水稻(O。 sativa L)品种为TN1（Taichung Native 1），由中国水稻所提供。

培育方法：（1）首先在70℃下浸泡水稻种子，时间为10 min；（2）换用常温自来浸泡水种子，置于30℃人工气候培养箱24 h；（3）除去泡种水，自来水冲洗2-3次，换用平底板加适量自来水，盖上湿纱布，置于人工气候培养箱催芽（人工气候箱条件：温度（25±1）℃、光强3 Ls、相对湿度65%、光照L14：D10）；（4）幼苗长至10 cm左右时，按照3-4棵为一株将苗移至稻田；（5）生长期间视情况2-3 d浇一次水，待水稻生长至分蘖中后期即可用于饲养褐飞虱。

供试昆虫：褐飞虱（N。 lugens）来自本实验室长期饲养种群，供试虫源来自浙江农科院杭州种群。

饲养方法：（1）分批饲养：取怀孕褐飞虱若干只，接种至含有新鲜水稻的养虫笼内。接种一天后，在第二天同一接种时间将怀孕褐飞虱全部移至另一养虫笼内，如此重复四次，保证每个养虫笼中的褐飞虱处于同一批次。（2）取TN-1水稻大苗，修剪枝叶，保留水稻秆部分，用湿棉花包扎根部，将其放入透明玻璃管（深度×管口直径为250 mm×30 mm）内。将显微注射后的褐飞虱接入到水稻苗上，用纱布对玻璃管进行封口，防止褐飞虱逃逸。养虫笼与透明玻璃管都统一放置于人工气候箱内，设置温度（25±1）℃、光强3 Ls、湿度65%，光照为L14：D10。