一氧化氮（Nitric Oxide, NO）是普遍存在于生物体中的气体信号分子，也是生物体内源产生的一种重要的氧化还原信号分子。NO参与植物种子萌发、生长发育、光形态建成、细胞分裂、程序性细胞死亡等一系列生理过程[11-13]。植物中NO的主要来源途径有三条：硝酸还原酶（Nitrate Reductase，NR）、氮氧合酶（Nitric Oxide Synthase，NOS）、和非酶促反应途径，而且在不同环境下NO合成的途径也有所不同[1]。近年来，不断有研究发现，NO作为植物体内的一种信号调节分子，还参与了植物对各种胁迫的应答[14]。研究发现，合适浓度的SNP（硝普钠，一氧化氮供体）处理能显著增加小麦幼苗SOD和CAT活性，降低由氯化钠处理引起的小麦叶片氧化损伤[15]。外源NO还可以降低重金属镉毒害下玉米幼苗丙二醛含量，升高其叶绿素含量，减弱其抗氧化酶活性[16]。外源NO单独处理逆境下的植物，对其会有一定的缓解作用，而且与部分信号分子共同作用下，缓解作用会加强。外源NO和过氧化氢共同处理Al胁迫下的大豆幼苗比分开单独处理对Al胁迫下大豆幼苗的缓解作用强[17]。有研究表明，外源NO的缓解作用具有双重性，低浓度NO可缓解逆环境对植物的伤害，而高浓度则具有一定的生理毒性。用0。1 mmol/L SNP处理高浓度硝酸盐胁迫下黄瓜幼苗，黄瓜幼苗体内SOD、CAT和APX活性显著升高，MDA含量显著降低，此浓度的SNP有效缓解了硝酸盐对黄瓜幼苗的毒害，但当0。3 mmol/L SNP处理硝酸盐胁迫下黄瓜幼苗后，发现SOD、CAT 和AP X活性都开始降低，MDA含量也开始增加，加重了硝酸盐对对黄瓜幼苗的毒害[18]。

大麦（Hordeum vulgare L。）是集经济作物、粮食作物和饲料作物于一体的农作物，为世界上第四大谷类作物[19]。大麦对解决不断增加的世界人口问题具有重要作用。在众多禾本科农作物中，大麦对Al毒害尤为敏感，在酸性土壤不断增加的现状下，大麦的种植面积及产量受到极大的影响。在农业种植过程中，大多采用铺洒石灰或者钙、镁、磷肥等方法对表层的土壤进行改良[19]。但这类方法存在用量大、耗费时间、需要大量人力等缺点，而且对底部的土壤改良不彻底，不符合现今可持续发展的战略目标。目前，已有不少有关外源NO缓解植物耐铝毒性研究的报道，但大多集中在水稻、小麦、大豆等农作物上，在大麦上的研究还很少。来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766

在Al胁迫的前提下，再加入SNP处理后，通过观察大麦幼苗的根长、活性氧、抗氧化酶系统、MDA及抗氧化物等指标，初步探讨外源NO缓解Al毒害对大麦幼苗的生理伤害。然后利用SRAP分子标记分析大麦幼苗根部DNA的损伤情况，对SRAP图谱与生理生化指标进行综合分析，以期结合生理生化与分子水平的相关指标探索外源NO对缓解大麦幼苗Al毒害的生理及分子机制，为Al污染治理、解决土壤Al毒问题及选育耐Al胁迫大麦品种，提高大麦产量和种植地提供理论参考。

1 材料和方法

1。1 实验材料处理

大麦处理：取两种不同基因型大麦（Z17和GP）用0。1%的H2O2溶液浸泡10min，马上用蒸馏水冲洗3次，浸种6h使其充分吸涨。将种子平铺在湿润滤纸上（滤纸下铺有薄薄一层湿润的脱脂棉），盖上保鲜膜并留小孔便于通气，置于26℃、湿度80%的人工智能气候培养箱中黑暗催芽、萌发。约48h后，种子露白，选取长势良好且一致的种子于全营养液进行培养。培养期间及时处理不生长的种子，防止发霉污染其他种子，至生长为有2-3片幼叶的幼苗后再进行实验。

Al处理：分别用0、10、20、50、100μmol/L的AlCl3（含1mmol/LCaCl2，pH5。5）对大麦幼苗进行Al处理。在培养过程中，及时检测培养液pH值，保持pH稳定于5。5。分别在培养0h、24h、48h、72h时，用直尺测量各处理组的大麦幼苗根长度，记录数据并计算各处理组大麦幼苗的相对根伸长量（具体操作见1。2）。根据实验结果，分析选取适宜的Al浓度（大麦幼苗根不停止伸长且表现出Al毒害症状的Al浓度即为适宜Al浓度）进行后续实验。