高温对棉花叶片叶绿素荧光参数的影响研究(3)
花粉萌发率检测从8月17至8月23日，共计4天。每天下午17:00-19:00采摘每个品种相同果节处即将开放的花蕾，带回实验室后室温过夜。第二天上午8:00左右待花蕾自然开放散粉后将花粉培养于30℃温度下，每个处理三次重复，之后在显微镜下统计不同培养温度下花粉萌发率。
花粉培养液配制：0.01%丝氨酸（W/V）、0.02%硼酸（W/V）0.01%谷氨酸（W/V）、0.07%硫酸锰（W/V）、0.01%脯氨酸（W/V）、0.01%赖氨酸（W/V）、40%蔗糖（W/V）、0.04%硝酸钙（W/V）、体积质量比配成100mL后4℃保存，使用前放置在室温。50μL培养液滴加于载玻片中央，轻轻拍打花朵使花粉分散于培养液上，数量100-300粒左右。然后在培养皿（直径9cm）底部垫三层滤纸，加10mL无菌水。将载玻片放入培养皿中，保鲜膜封口，保鲜膜扎3个孔，保持培养皿内70%-80%的湿度，之后将培养皿放入培养箱中培养（SPX-1000B-2，中国上海）3-4h。Microscope X S-215显微镜（视场：WF10×/18，物镜：10/0.25，160）10×10下观察，统计10个视野，每个样品统计200粒左右，花粉粒萌发标准为花粉管长度大于或等于花粉粒直径（图ⅠA、B）。花粉萌发率（%）=萌发花粉粒数/总花粉粒数×100%。
将做完了萌发率实验的花的花瓣及花萼去除，在体视镜下观察柱头突出情况，随后用镊子将雄蕊从花上剥离置于载玻片上，用体视镜观察花丝长度。
南京优尔合区每日气温数据来源于中国天气网每日发布信息。通过Excel制表作图，如图1。
1.2.3棉花叶片光响应曲线及光合速率测定
在15个棉花品种中选取3个品种，于8月中旬选择晴朗无云天气，优尔合试验地10:00-18:00用LI-6400型便携式光合系统分析仪（LI-CORInc.，Lincoln，Nebraska，USA）测定倒四叶净光合速率（Pn）等光合作用指标。采用LI-6400-02B自带红蓝光源（LED），设定光合测定仪有效光辐射强度（PAR）2500、2000、1500、1000和500µmol•m-2•s-1，叶室温度控制在29±0.5°C范围内，适应3-5min后测定陆地棉功能叶光合指标参数。每个品种三个重复，仪器测定值在相对误差大于5%时进行匹配。
1.2.4田间产量及考种性状调查
棉花收获后室内考种，以小区收获计产。采用Excel、SPSS作图及处理数据
2结果与分析
2.1日最高温变化规律
中国气象局规定日最高气温≥35℃的天气为高温天气。根据气象部门发布的每日温度的统计结果，6月26日（苗期Ⅰ）在经历温度的逐步升高后，最高温度达到29℃；随后温度再次震荡，于6月30日（苗期Ⅱ）达到最高温度为32℃的水平；7月18日（蕾期Ⅰ）在经过前一日的小幅上升后最高气温为32℃，且前一日至当天都是雷雨天气；7月22日（蕾期Ⅱ）在经过前两日的逐步上升，最高温度达到35℃；7月28日（蕾期Ⅲ）在持续两天高温后略有回落到最高气温为37℃的水平；最高气温再次逐步下降，到8月1日（花铃期Ⅰ）最高气温为35℃；8月5日（花铃期Ⅱ）经过气温的回落再上升，最高气温达到32℃；8月11日（花铃期Ⅲ）经过温度的逐步上升达到35℃的最高气温水平。
2.2不同生育期棉花叶片叶绿素荧光参数分析
2.2.1最小荧光强度Fo变化
FO是指当所有反应中心完全开放时的荧光，即暗适应后的最小荧光强度。由图2可见，苗期在三个生育期中数值水平相对最高，高温胁迫对蕾期和花铃期的影响不显著。蕾期Ⅰ的异常上升或与之前的雷雨天气有关。
综合三个生育期的表现，整体数值水平较低的品种有中棉所43号、新陆早60号和新陆早50号；整体数值水平较高的品种有新陆中42号、新陆早62号和中棉所41号。
