摘要：禽致病性大肠杆菌（Avian Pathogenic E。coli,APEC)属于肠道外致病性大肠杆菌（E×PEC）的成员，定植于肠道外，能够引起禽的局部活全身感染性疾病——大肠杆菌病。

RNA是生物体重要的遗传物质，提取的RNA可用于下游的分子生物学实验。常见的细菌RNA的提取方法有很多，本课题尝试2种实验方法对鸡血中的收集的APEC E1株RNA进行提取和比较。因为在血液中富集细菌较难，故分别在5h和18h对SPF鸡进行采血，摸索不同富集时间对细菌提RNA的影响。92662

毕业论文关键词：禽致病性大肠杆菌，APEC,RNA提取

Abstract：Avian pathogenic E。 coli (APEC), a member of the outer pathogenic Escherichia coli (ExPEC), is planted outside the intestine and can cause localized systemic infectious diseases of the birds - E。 coli disease。

RNA is an important genetic material of the organism, and the extracted RNA can be used for downstream molecular biology experiments。 There are many methods for the extraction of common bacterial RNA。 In this study, two kinds of experimental methods were used to extract and compare the RNA of APEC E1 cells collected from chicken blood。 Because the bacteria were difficult to accumulate in the blood, the blood of SPF chickens were collected after inoculation 5h and 18h respectively, and the effect of different enrichment time on RNA was explored。

Key Word：Avian pathogenic Escherichia coli, bacteria in blood, RNA extraction 

目录

1 前言 4

2 材料 4

2。1 菌株 4

2。2 主要试剂 4

2。3 需配制的试剂 4

2。4 使用仪器 5

2。5 实验动物 5

3 实验步骤 5

3。1 SPF鸡的准备 5

3。2 LB培养基中细菌的培养 6

3。3 鸡血中细菌的富集和分离 6

3。4 RNA的提取 6

2。4。1传统法提RNA 6

2。4。1。1 鸡血清中细菌RNA的提取 6

3。4。1。2 LB培养基中细菌RNA的提取 6

3。4。2RNAiso plus试剂盒法提RNA 6

3。4。2。1 鸡血清中细菌RNA的提取 6

3。4。1。2 LB培养基中细菌RNA的提取 7

3。5 RNA质量检查 7

3。6 RNA电泳检查 7

4 实验结果 7

4。1 鸡血中细菌的富集 7

4。2 细菌在鸡血中的富集时间对结果的影响 8

4。3 RNA的提取 8

4。3。1 传统法提RNA 8

4。3。2 RNAiso plus试剂盒法提RNA 9

结 论 11

致  谢 12

1 前言

    禽致病性大肠杆菌（APEC）是指能够引起鸡鸭鹅等禽类致病的大肠杆菌，是定植于肠道外的能引起禽类全身感染性的疾病的大肠杆菌。禽大肠杆菌病[1]是由致病性大肠杆菌引发的禽类的急、慢性病的总称。