2。3  培养基及培养液的配制文献综述

配制产生物膜培养基及培养液LBGM(LB+1%甘油+0。1mM MnSO4),灭菌后加入经细菌过滤器过滤除菌的硫酸镉母液至镉离子终浓度分别为0/5/10/15/20/25mg/L。

2。4  HNU-1和HNU-1(epsA-O)在不同Cd2+浓度的培养基中生长情况检测

将活化的HNNU-1和HNU-1(epsA-O)菌株用牙签挑取后接种于LB液体培养基中,在30-35℃条件下在160rpm摇床上培养18-24小时,获得浓度为106CFU/ml的种子液。

菌株HNU-1及突变体在固体培养基上生物膜产生情况:

吸取上述种子液5ul分别接种到终浓度分别为0/5/10/15/20/25mg/L 的LBGM培养基表面,每个浓度三次重复,标记后放入30°C培养箱中培养48h,观察结果并拍照记录。

菌株HNU-1及突变体在液体培养基上生物膜产生情况:

分别吸取5ul上述种子液接种至4 ml 终浓度分别为0/5/10/15/20/25mg/L 的LBGM培养液中(十二孔板),30 ℃培养72h后观察生物膜形成情况并拍照记录。

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