近年来,以大型水生植物为核心的污水处理和水体修复的生态技术已成为环境领域的研究热点之一[3]。其中浮萍以繁殖速度快,容易打捞,适应能力强等优势占据重要地位。据了解,浮萍在重金属吸附、有机物去除和克藻研究方面已经取得了一定的进展[4]。

浮萍属于被子植物门(Magnoliophyta)单子叶植物纲(Liliopsida)棕榈亚纲(Arecidae)天南星目(Arales)浮萍科(Lemnaceae)[5]。浮萍科(Lemnaceae)植物,通常简称浮萍,是世界上最小,形态最简单的开花植物。它可分为5个属:紫萍属(Spirodela)、浮萍属(Lemna)、少根紫萍属(Landoltia)、芜萍属(Wolffia)、扁平无根萍属(Wolffiella)[6]。

浮萍科植物小而简单,并且它具有许多其他高等水生植物所不具备的优点:a。体积小,方便收获。b。生长范围广,适应性强。c。生长繁殖速度快,且生长期长,生产总量高。d。氮、磷及蛋白质含量高,叶黄素和赖氨酸含量丰富,纤维素含量低,适应性好。e。生物安全性高,不会形成重金属聚集,也不会因生物大规模生长造成水体二次污染。f。含有多种化学和疗效成分,具有药用价值[7]。因此,浮萍不仅被广泛应用于水体污染的治理,而且被广泛应用于植物生理学、生态学、遗传学以及水体污染检测等诸多方面[8]。文献综述

目前,关于浮萍的研究和应用越来越受到关注和青睐。分类鉴定是从事一切浮萍科植物研究的前提和基础。然而,浮萍主要进行无性繁殖,形态简单,这使得物种鉴定尤其困难。

20世纪80年代以来DNA分子标记技术的发展,极大的推动了植物遗传学多样性、系统发育与进化和分子育种等领域研究的发展[9]。核糖体rDNA的高度保守序列,如非转录间隔区(NTS),在生物进化中显示种的特征,种内具有高度保守性,在不同种间又有不同程度的变异,是理想的种间鉴定的遗传标记[10],已经应用于玉米、小麦和土豆等[11]物种的分子鉴定和分子遗传研究。

本文利用5S rDNA NTS作为分子标记,根据浮萍5S rDNA序列中的高度保守序列设计的一对引物,运用PCR扩增、克隆等手段,得到5S rDNA NTS序列。通过比对同一物种的不同克隆以及同一属的不同物种的5S rDNA非转录间隔区碱基序列,以探寻出同一物种的不同克隆和不同物种间5S rDNA NTS序列差异,为浮萍科植物的物种鉴定和分类提供理论依据。

2  材料和方法

2。1  材料

2。1。1  样品来源

本研究所用材料浮萍(Lemna gibba)无菌生长于SH(Schenk&Hildebrant)培养基中,菌株W。 welwitschii229-9381和W。 gladiata418-7590于室温保存。样品编号为1和2。试验浮萍由Nikolai教授提供。

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