表2 蛋白质标准曲线的制作
管号 0 1 2 3 4 5 6
100μg/ml标准蛋白液(ml) 0 0。1 0。2 0。4 0。6 0。8 1。0
蒸馏水(ml) 1 0。9 0。8 0。6 0。4 0。2 0
考马斯亮蓝G-250试剂(ml) 5 5 5 5 5 5 5
蛋白质含量(μg) 0 10 20 40 60 80 100
OD595nm 0
以表中标准蛋白含量为纵坐标,OD595测定值为横坐标,在EXCEL中绘制标准曲线。求得标准曲线斜率公式:y=kx+b,y为蛋白含量(μg)。
1。3。4 可溶性固形物含量(SSC)测定
用手持折光仪测定。取西葫芦果肉打浆成汁,用4层纱布过滤后,取2滴汁液滴于折光仪镜面中央,迅速闭合上下二棱镜,对准光源,由目镜观察,并旋动微动螺旋,使明镜两部界限明析,记录标尺上明镜分界线所示数字,即为果实SSC%含量。重复测定3次,求平均值。文献综述
1。3。5 维生素C(Vc)含量测定
采用分光光度计比色法。
(1)样品Vc测定方法
称取10 g果蔬组织置于研钵中,加人20mL 50g/L TCA(三氯乙酸)溶液,在冰浴条件下研磨成浆状,转人到100mL容量瓶中,并用50g/L TCA溶液定容至刻度,混合、提取10min后,过滤,收集滤液备用。
取1。0mL样品提取液于试管中,加人1。0mL 50g/L TCA溶液,再依次加入1。0mL 无水乙醇、0。5mL 0。4%磷酸-乙醇溶液、1。0mL 5g/L BP-乙醇溶液、0。5mL 0。3g/L FeCl3-乙醇溶液,每加入一种后立即混匀,将混合液置于30 ℃下反应60min后,于波长534nm处分光光度计测定吸光度值。重复三次。