摘 要：近年来，分子克隆的技术高速发展，在物种鉴定方面的应用取得了很好的成效。浮萍是一类体积较小，形态较为简单的单子叶植物，以往基于其形态学的研究无法深入，本实验所采用的wolffia属浮萍是一种单子叶植物，为了进一步区分这一属的类别，根据5S rDNA的序列的高度保守性，设计引物扩增出5S rDNA之间的非转录间隔序列，通过测序的手段，得到具体的序列，进而比对同一物种不同拷贝间的差异以及不同物种5S rDNA间非转录间区的差异，从而对wolffia属浮萍的分类提供依据。94081

毕业论文关键词：Wolffia属浮萍，5S rDNA，非转录间区 

Abstract: In recent years, molecular cloning technology has been rapid developed, in the application of species identification has achieved very good results。 Duckweed is a kind of smaller, simple form of monocotyledonous plants, in the past based on its morphological research can not be deep, wolffia duckweed used in the experiment  is a monocotyledonous plant, in order to further distinguish this genus according to the highly conserved sequence of 5S rDNA, the primers were designed to amplify the non-transcribed spacer sequences between 5S rDNA。 By means of sequencing, the specific sequences were obtained, and then the differences between the different copies of the same species and the different species 5S rDNA non-transcribed intermolecular differences, so as to provide a basis for the classification of wolffia duckweed。源C于H优J尔W论R文M网WwW.youeRw.com 原文+QQ752-018766

Keywords: duckweed Wolffia a, 5S rDNA, non-transcribed region

目   录

1前言 5

2材料和方法 5

2。1实验材料 5

2。1。1实验菌株 5

2。1。2主要试剂和仪器设备 5

2。2实验方法 5

2。2。1浮萍基因组DNA提取 5

2。2。2 NTS序列扩增 6

2。2。3 扩增片段的连接 6

2。2。4 扩增片段的转化 7

3结果与分析 7

3。1 DNA提取结果 7

3。2 目的基因的扩增结果 8

3。3 重组子的菌落生长结果 8

3。4 阳性克隆鉴定 9

3。5 测序结果 10

3。6 NTS序列分析 15

4 总结 17

5 参考文献 18

6 致谢 19

1 前言

浮萍是世界上最小的被子植物,可以分为五个属，分别为紫萍属(Spirodela)、浮萍属(Lemna)、少根紫萍属(Landoltia）、芜萍属(Wolffia)、扁平无根萍属(Wolffiella)[1]，浮萍的形态变化不明显，作为最小的单子叶植物，其繁殖力和环境适应力很强。

浮萍科植物作为小型浮叶植物，可快速吸收转化水体N、P元素，近年来被广泛用于N、P污水的生态进化处理[2]。此外浮萍具有丰富的淀粉，碳水化合物，蛋白质，粗纤维，矿物质、油脂等营养元素，可以作为良好的饲料和很好的绿色生物燃料[3]。论文网

因为浮萍形态小，形态简单，基于形态学无法对浮萍作出精确分类[4]，所以如今物种鉴定采用分子方法，5S rDNA用现有的测序技术很容易得到其序列。核糖体RNA在各种生物中都有其特性，因此可以从不同生物的rRNA的对比中得出关于生物进化历程的结论。核糖体RNA按沉降系数可分为5S，16S，25S rRNA，大多数原核生物中rDNA含有多个拷贝。核编码的5S核糖体DNA它通常普遍存在并且容易分离，并且由于其小的尺寸，可以直接进行RNA测序方法,是许多植物家族中成功使用的常用标记之一[5]。5S rDNA除了是生物多样性标记外，还是核糖体的一个整合部分。它在核糖体生物发生中起着至关重要的作用，因此在控制植物发育和生长，这是浮萍生物量生产的重要特征。