旋覆花对土壤含水量的生理生化响应(2)
水对于植物生长是必不可少的，参与到植物的光合、呼吸、代谢等生命过程，在植物生长过程中至关重要，而土壤含水量是植物规范化栽培种植中不可忽视的条件之一，土壤含水量过多或过少均将对植物的形态、生理等各方面产生影响[5]。植株的长势，外观形态是植物适应环境的一种直观表现；但仅仅这样是不足以适应逆境而生存的，于是植物体内进化出了一系列适应机制，在生理生化方面发生响应，从而更好的生存，其表现得比形态指标更加迅速[6]。土壤含水量对植物生理生化影响的研究前人作了不少，药用植物方面的就有夏枯草[7]、广藿香[8]等的研究，但有关旋覆花方面的研究并没有人做过。前人曾调查湖北恩施附近的野生旋覆花，发现野生旋覆花多分布于周围环境湿度较高，无明显积水的地方[9]，可见其对于水分要求较严格，研究土壤含水量对旋覆花生理生化的影响就更加重要。
为此，本探究以旋覆花为实验材料，通过盆栽实验和连续控制土壤含水量的方法，测定不同水分处理下旋覆花的光合色素、可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、丙二醛、抗坏血酸、保护酶等生理生化指标，研究旋覆花在不同土壤含水量处理下的生理生化变化特点，探究旋覆花对土壤含水量的生理生化响应特点，确定旋覆花生长的最适含水量，以期能为日后旋覆花适应水份的生理机制和栽培研究提供参考。
1 材料与试验方法
1．1 试验材料
2016年3月于江苏省南京市江宁区湖熟镇挖取旋覆花幼苗，移栽于南京农业大学中药研究所干旱防雨大棚内。试验材料经王长林副教授鉴定为菊科旋覆花属植物旋覆花（Inula japonica Thunb.）。
1．2 试验设计
采用盆栽试验。待从野外移植的旋覆花幼苗在大棚中生长一周左右后，选择健康无病害、长势基本一致的幼苗栽种在统一规格塑料花盆中（上径×高度×下径：18 cm×15 cm×16 cm）。试验用土来自南京紫金山。每盆装土4 kg，土壤田间持水量（FC）测得为32.29%。设置5个土壤含水量范围，分别为土壤含水量（RWC）为田间持水量的30%~35%（严重干旱，SD）、45%~50%（中度干旱，MD）、60%~65%（适度水分，CK）和75%~80%（中度湿润，MW）和85%~90%（过度湿润，HW）。每个处理5盆，每盆8株幼苗。土壤含水量的控制采用称重法，每天定时整盆称重并注意补水，使各处理的土壤含水量文持在设定的水分含量区间内[10]。持续水分处理，每隔15d采集相同部位的叶片，测定可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、丙二醛的含量，共测定4次；15d测定光合色素的含量，测定1次；45d时测定保护酶活性和抗坏血酸含量，测定1次。
1．3 实验仪器
万分之一电子天平（上海卓精电子科技有限公司）；HH-S型数显电热恒温水浴锅（巩义市予华仪器有限责任公司）；Alpha-1506型紫外-可见分光光度计(上海谱元仪器有限公司)；eppendorf台式高速冷冻离心机；KQ-250B型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）
1．4 实验试剂
无水乙醇、95%乙醇、石英砂、碳酸钙粉、浓硫酸、蒽酮、乙酸乙酯、葡萄糖、牛血清蛋白、考马斯亮蓝G-250、蒸馏水、茚三酮、冰醋酸、磷酸、磺基水杨酸、甲苯、三氯乙酸、硫代巴比妥酸 、草酸、2,6-二氯酚靛酚、纯抗坏血酸、碳酸氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、聚乙烯吡咯烷酮、高锰酸钾标准溶液、过氧化氢、愈创木酚、甲硫氨酸、氮蓝四唑、核黄素、乙二胺四乙酸二钠。