苦瓜砧木对高温胁迫下嫁接黄瓜叶片光合作用及植株生长的影响(3)
1. 2. 3 基因表达量 在少量的黄瓜幼苗的叶片中加入少量Trizol溶液，把加了该溶液的叶片放在研磨器中，认真进行研磨，随后将其倒入EP管中。将EP管中的溶液摇匀并且进行静置一段时间后，滴入少量的氯仿。再次将其摇匀后，继续进行静置。静置到差不多的时间以后开始进行离心。离心后会出现一层水相，分离出来并将其转入到EP管中，并在其中滴加少许的异丙醇，充分混合使其彻底的均匀，随后再进行一次离心。离心后的沉淀液需要取出来，在其中加入少量75%的预冷乙醇，随后进行充分的振荡使其均匀混合。把沉淀进行洗涤后再次进行离心。离心后将沉淀吹干，此时需要将已经提取出来的RNA放置于-75℃冰箱中进行保存。完成一系列步骤以后再运用实时荧光定量PCR技术检测所需研究的一些酶的基因表达。根据TAKARA公司提供的试剂盒中的方法，反转录RT-PCR合成cDNA模板，RT-PCR程序结束后，用1.2%琼脂糖凝胶电泳检测cDNA扩增情况[14]。
1.3 数据处理及分析
数据通过Excel 2003绘图和SPSS 20. 0软件进行数据方差的分析，多重比较采用 Duncan’s法进行多重比较(P＜0.05)。
2 结果与分析
2．1 高温胁迫下苦瓜砧木嫁接对黄瓜幼苗生长的影响
从表1中可以看出，与常温处理相比较，高温处理7d以后，苦瓜砧木嫁接的黄瓜幼苗以及黄瓜自根嫁接幼苗的地上部鲜重、地下部鲜重和第四片完全展开叶的鲜重均呈现显著下降的趋势(P＜0.05)，黄瓜自根嫁接苗在高温条件下，其地上部鲜重、地下部鲜重和第四片完全展开叶的鲜重分别下降了45.5%、3.6%、74.6%，同时，苦瓜砧木嫁接的对应的三项生长指标的参数分别下降了55.3%、7.9%、49.2%，这些数据可以说明高温胁迫对黄瓜幼苗地上部及叶片的生长的抑制作用是十分显著的。
从表中还可以看出，在常温下，苦瓜砧木嫁接与黄瓜自根嫁接苗相比较来看，苦瓜砧木嫁接后，对黄瓜幼苗的地上部干重和地上部鲜重都产生了显著的影响，根据数据来看，提高了35.7%，而对于其他部分的干重鲜重并没有显著影响。常温下黄瓜自根嫁接苗的地上部、地下部以及根的鲜重与高温下相比有显著差异，但苦瓜砧木嫁接黄瓜以后，由于高温胁迫而对黄瓜幼苗的地上部、地下部、第四片完全展开叶的生长的抑制作用明显得到了缓解，这项实验结果可以说明，苦瓜砧木嫁接对黄瓜幼苗高温胁迫下的伤害有缓解的作用[15]。
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