安吉白茶不同发育阶段维生素C含量的测定(3)
虽然文生素C的测定方法越来越多，且也愈加完善，但大多数方法都存在着自己的局限与缺点。如滴定法的缺点是不能直接对样品中文生素C进行定量分析的，且易受其他物质的干扰，如果滴定材料中含有色素，将会对滴定终点的判断造成很大影响[32]。荧光光度分析法能够准确地对文生素C进行定量分析，但滴定范围十分有限，且花费较高，故当实验材料小，且其中的文生素C含量不多时才可以使用。紫外分光光度法干扰比较严重，材料需要经过前处理，且一种显色剂很难能够同时测定，因此在多组实验同时测定时并不适用[33-34]。梅特勒-托利多仪器法作为一种全自动、全机械化的文生素C测定方法，还未被大众人群所接受。本研究所利用的高效液相色谱法测定文生素C的含量，因其操作简单，测定范围广，测定速度快，定量分析灵敏度高，这种方法已经被越来越多的实验组织所采纳，并被广泛应用于多种食品、药物的文生素C定量分析之中[35-37]。
1 材料与方法
1．1 仪器与试剂
1.1.1 实验仪器
LC-20A高效液相色谱仪（日本岛津有限公司），配紫外检测器；色谱柱Hedera ODS-2 C18（4.6 mm×250 mm，5 um）[38]；离心机；电子天平；研钵；量筒；2000 mL和1000 mL容量瓶；布氏漏斗；烧杯。
1.1.2 实验试剂
草酸晶体（H2C2O4•2H2O）；甲醇（CH3OH）；文生素C的标准品；去离子水。
1.1.3 实验材料
南京农业大学茶学研究所中温室培养的安吉白茶扦插苗数棵，绝对低温控制在10 ℃以下，相对湿度控制在80%左右，模拟安吉白茶最适宜的生长环境[4]。扦插苗发育正常，无病虫害且叶片完好，分别取一、二、三片叶。